新基因MXRA7的組織學表達及功能研究.pdf

1、目的：
　　基質(zhì)重建相關分子7（MXRA7），是經(jīng)生物信息學預測存在的基因，已有越來越多的生物信息學資料如高通量數(shù)據(jù)證實該基因的存在，但目前對其生物學功能還知之甚少。本課題組應用全基因組表達芯片技術，在研究小鼠角膜炎性損傷后新生血管的病理過程中差異表達基因時，捕捉到了MXRA7基因的變化。本研究擬在生物信息學預測分析和前期實驗數(shù)據(jù)的基礎上，探究MXRA7基因在小鼠不同組織的表達分布及生物學功能。
　　方法：
　　運用現(xiàn)

2、有數(shù)據(jù)庫資源，用生物信息學方法分析MXRA7基因在小鼠不同組織的表達與生物學功能。引進構(gòu)建MXRA7基因缺陷小鼠，研究正常野生型小鼠與缺陷小鼠之間的生理學差異。應用熒光實時定量PCR技術（RT-qPCR）檢測MXRA7基因在不同組織中mRNA的表達水平。根據(jù)基因的組織表達分布及可能的預測功能，在MXRA7基因野生型與缺陷型小鼠建立不同的疾病模型：耳洞損傷修復模型，Matrigel新生血管模型及主動脈內(nèi)皮細胞體外誘導成毛細血管網(wǎng)腔模型。<

3、br>　　結(jié)果：
　　成功繁育可穩(wěn)定遺傳的MXRA7基因缺陷小鼠。RT-qPCR檢測顯示該基因mRNA在小鼠各主要組織或器官中廣泛表達，表達水平最高的依次為眼睛、肺、腦，表達最低是骨髓。耳洞損傷修復實驗發(fā)現(xiàn)，MXRA7基因缺陷鼠耳洞愈合程度明顯低于野生型鼠，且在耳洞損傷后第13、26、32天的耳洞面積有差異，差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；損傷愈合組織經(jīng)HE染色后統(tǒng)計分析，兩組小鼠的組織橫截面積相近或無明顯差異；Masson染色

4、分析，缺陷型小鼠耳洞愈合組織結(jié)締組織較野生型致密，愈合組織血管分析顯示野生型小鼠微血管密度高于缺陷型。Matrigel膠體內(nèi)成毛細血管實驗顯示，野生型組小鼠Matrigel膠體內(nèi)血管密度、紅細胞數(shù)量明顯高于缺陷鼠組。主動脈內(nèi)皮細胞體外誘導成毛細血管網(wǎng)腔實驗證明，MXRA7野生型小鼠內(nèi)皮細胞成管能力優(yōu)于缺陷型。
　　結(jié)論：
　　實驗研究發(fā)現(xiàn)MXRA7基因在機體廣泛表達，MXRA7基因在損傷修復等胞外基質(zhì)重建系統(tǒng)中發(fā)揮一定的功能