絲膠對(duì)糖尿病腎病的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　 通過(guò)觀察絲膠對(duì)糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）模型大鼠腎臟的保護(hù)作用，一方面探討絲膠治療和預(yù)防DN的作用及機(jī)制，另一方面進(jìn)一步深入探討DN的發(fā)病機(jī)制。
　　 方法：
　　 清潔級(jí)雄性SD大鼠60只，隨機(jī)分為5組：正常對(duì)照組、DN模型組、絲膠治療組、絲膠預(yù)防組和二甲雙胍治療組，每組12只。正常對(duì)照組大鼠，不做任何處理；模型組、絲膠預(yù)防組、絲膠治療組和二甲雙胍組大鼠均采用2％

2、STZ（25mg/kg/d，3d）腹腔注射建立DN動(dòng)物模型。待模型成功建立后，模型組大鼠不再作任何處理；絲膠治療組大鼠給予絲膠（2.4g/kg/d）灌胃治療35天，二甲雙胍組大鼠給予二甲雙胍（55.33 mg/kg/d）灌胃治療，時(shí)間同絲膠治療組。絲膠預(yù)防組大鼠在注射STZ前給予絲膠（2.4g/kg/d）灌胃35天。
　　 分別檢測(cè)各組大鼠的血糖（blood glucose，BG）、24小時(shí)尿蛋白定量、腎重/體重、血肌酐和血尿素

3、氮；HE染色觀察腎的組織結(jié)構(gòu)；免疫組織化學(xué)染色觀察腎臟轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β，（transforming growth factor-β1，TGF-β1）、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-1（tissue inhibitors of maprix metalloproteinases-1，TIMP-1）和色素上皮衍生因子（pigmem epthelium-derived factor，PEDF）的表達(dá)：Western Blotting方法檢測(cè)腎臟

4、Smad3和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.各組大鼠的BG：與正常對(duì)照組大鼠相比，模型組大鼠的BG明顯升高（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預(yù)防組和二甲雙胍組大鼠的BG明顯低于模型組（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預(yù)防組與二甲雙胍組比較無(wú)明顯差別（P>0.05）。
　　 2.各組大鼠的24 h尿蛋白定量和腎

5、重/體重：與正常對(duì)照組大鼠相比，模型組大鼠的24 h尿蛋白定量和。腎重/體重明顯升高（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預(yù)防組和二甲雙胍組大鼠的24 h尿蛋白定量明顯低于模型組（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預(yù)防組與二甲雙胍組比較無(wú)明顯差別（P>0.05）；絲膠治療組、絲膠預(yù)防組大鼠的腎重/體重明顯低于模型組（P<0.01），且明顯低于二甲雙胍組（P<0.05）。
　　 3.各組大鼠的血肌酐和尿素氮含量：模型組大鼠的血肌酐和尿

6、素氮含量較正常對(duì)照組大鼠顯著升高（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預(yù)防組和二甲雙胍組大鼠的血肌酐和尿素氮含量明顯低于模型大鼠（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預(yù)防組與二甲雙胍組比較無(wú)明顯差別（P>0.05）。
　　 4.HE染色：（1）正常組：腎小球、腎小管結(jié)構(gòu)清晰，未見(jiàn)異常改變。（2）模型組大鼠的。腎小球、腎小管均發(fā)生明顯病理變化：腎小囊腔較正常大鼠顯著擴(kuò)張，部分血管球萎縮，偶見(jiàn)玻璃樣變性；部分腎小管上皮細(xì)胞腫脹、空泡變性；

7、間質(zhì)出現(xiàn)明顯淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。（3）絲膠治療組大鼠腎臟病變的程度明顯減輕，但仍可見(jiàn)個(gè)別腎小囊腔增寬、部分腎小管上皮細(xì)胞排列紊亂。（4）絲膠預(yù)防組：未見(jiàn)明顯病理變化，腎組織結(jié)構(gòu)與正常組更為接近。
　　 5.各組大鼠腎臟Smad3和VEGF蛋白的表達(dá)：模型大鼠腎臟Smad3蛋白和VEGF蛋白的含量明顯高于正常對(duì)照組大鼠（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預(yù)防組和二甲雙胍組大鼠腎臟Smad3和VEGF蛋白表達(dá)明顯低于模型大鼠（P<0.01）

8、，且絲膠治療組、絲膠預(yù)防組與二甲雙胍組比較無(wú)明顯差別（P>0.05）。
　　 6.各組大鼠腎臟TGF-β1和FIMP-1蛋白的表達(dá)：TGF-β1和TIMP-1免疫陽(yáng)性產(chǎn)物均呈棕黃色細(xì)膩顆粒狀，位于細(xì)胞漿；TGF-β1免疫陽(yáng)性細(xì)胞包括腎小囊壁層上皮細(xì)胞、足細(xì)胞和球內(nèi)系膜細(xì)胞，TMP-1免疫陽(yáng)性細(xì)胞為腎小球球內(nèi)系膜細(xì)胞。與正常對(duì)照組大鼠相比，模型大鼠腎臟TGF-β1和TIMP-1蛋白的表達(dá)明顯增高（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預(yù)

9、防組和二甲雙胍組大鼠腎臟TGF-β1和TIMP-1蛋白的表達(dá)明顯低于模型大鼠（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預(yù)防組與二甲雙胍組比較無(wú)明顯差別（P>0.05）。
　　 7.各組大鼠腎臟PEDF蛋白的表達(dá)：PEDF免疫陽(yáng)性產(chǎn)物呈棕黃色顆粒狀，位于細(xì)胞漿，免疫陽(yáng)性細(xì)胞為。腎小管上皮細(xì)胞。與正常對(duì)照組大鼠相比，模型大鼠腎臟PEDF蛋白的表達(dá)明顯下調(diào)（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預(yù)防組和二甲雙胍組大鼠腎臟PEDF蛋白的表達(dá)明顯高于

10、模型大鼠（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預(yù)防組與二甲雙胍組比較無(wú)明顯差別（戶>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.絲膠可降低DN大鼠血糖，改善DN大鼠的腎功能，對(duì)DN有一定的治療和預(yù)防作用。
　　 2.絲膠可抑制DN大鼠。腎臟TGF-β1/Smad3信號(hào)通路的激活，改善腎臟VEGF和PEDF蛋白的不平衡表達(dá)，下調(diào)腎臟TIMP-1蛋白的表達(dá)，對(duì)DN大鼠腎臟損傷具有保護(hù)和預(yù)防作用。
　　 3.絲膠預(yù)防和