氬氦冷凍消融治療乙肝相關性肝細胞癌后調節(jié)性T細胞變化及其對預后的影響.pdf

1、研究背景：氬氦刀(argon-helium cryosurgical ablation system，CSA)是一種新的冷凍外科(cryosurgery)治療手段，其基本原理是利用氬氣快速制冷產(chǎn)生的超低溫(<-140℃)作用于病變組織引起細胞內外冰晶形成、細胞脫水，氦氣快速復溫(20-40℃)，導致腫瘤組織細胞壞死。目前這種微創(chuàng)外科技術是無法切除的中晚期HCC最為主要的局部治療方法。氬氦刀除了對腫瘤的直接清除作用外，還能增強術后的抗腫瘤

2、免疫。近年研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤周圍有大量CD4+CD25+FoxP3+調節(jié)性T細胞(reguolatory T cells，Treg)浸潤，通過抑制或殺傷效應性CD8+或CD4+T細胞而抑制機體的抗腫瘤免疫；相反，通過去除荷瘤鼠體內的Treg細胞可使抗腫瘤作用增強。我們的前期研究顯示，調節(jié)性T細胞數(shù)量的升高與HCC患者預后較差有關.本研究通過氬氦刀冷凍治療HCC患者，了解冷凍治療對HCC患者調節(jié)性T細胞表達的影響，同時探索調節(jié)性T細胞變化對H

3、CC患者預后的影響及其意義。
　　 方法：利用流式細胞儀檢測101例HCC患者外周血調節(jié)性T細胞頻率，同時對34例HCC病人進行氬氦刀治療，隨訪治療前后調節(jié)性T細胞頻率及功能的變化，分析調節(jié)性T細胞頻率變化與血清AFP水平之間的相關性，同時在治療前后取原位肝癌組織進行免疫組化檢測CD4、CD8和FoxP3。
　　 結果：我們觀察到：(1)隨著肝癌的進展，外周血中調節(jié)性T細胞頻率逐漸增加，早期、中期、進展期、終末期HCC患

4、者的Treg頻率分別為6.89±1.27％，9.13±1.36％，10.32±2.04％和13.4±2.81％。(2)氬氦冷凍治療后腫瘤緩解的17例HCC病人，隨訪結束時其Treg頻率較術前降低，其中7例術前AFP陽性(>20ng/mL)的患者，術后Treg頻率亦隨AFP的降低而降低；對于腫瘤進展的14例HCC病人，隨訪結束時其Treg頻率較術前明顯升高，其中9例術前AFP陽性(>20ng/mL)的患者，腫瘤進展時亦伴有AFP的再次升高

5、。(3)在治療前后HCC患者Treg細胞對于健康人PBMC均有免疫抑制功能，其免疫抑制功能與是否治療及腫瘤是否進展無關。(4)氬氦冷凍治療后HCC患者冷凍區(qū)域旁腫瘤組織浸潤的CD8+T細胞、CD4+T細胞和FoxP3+T細胞的數(shù)量均顯著低于術前，治療后的FoxP3+/CD8+比值較術前明顯降低。
　　 結論：氬氦冷凍消融治療可降低HCC患者Treg頻率，Treg頻率的變化具有判斷HCC病人腫瘤是否進展的意義，尤其是AFP陰性的H