NGF對支氣管哮喘大鼠氣道炎癥的影響及作用機制的研究.pdf

1、目的: 建立支氣管哮喘大鼠模型，用抗NGF腹腔注射哮喘大鼠，通過觀察大鼠氣道及周圍肺組織的病理學(xué)改變；BALF總細胞及細胞分類計數(shù)的變化；BALF中IL-4、IFN-γ、NGF的蛋白變化水平及肺組織中IL-4、IFN-γ、NGFmRNA變化水平，探討NGF對支氣管哮喘大鼠氣道炎癥的影響及可能作用機制，尋求治療哮喘的新靶點。 方法: 將24只成年雄性SD大鼠按隨機數(shù)字法分為正常對照組(A組)、哮喘組(B組)和抗NGF組(C組)，每

2、組8只。用10％OVA生理鹽水致敏液注射大鼠腹腔致敏后霧化吸入1％OVA溶液誘導(dǎo)建立哮喘動物模型。A組大鼠用生理鹽水代替OVA溶液于大鼠腹腔內(nèi)注射及霧化吸入；C組大鼠在霧化吸入前給予NGF抗體腹腔注射。用HE染色觀察3組大鼠氣道及周圍肺組織的病理學(xué)改變；提取3組大鼠BALF，測定總細胞及細胞分類計數(shù)；用ELISA法檢測各組大鼠BALF中IL-4、IFN-γ、NGF的含量；采用RT-PCR檢測各組大鼠肺組織中IL-4、IFN-γ、NGFm

3、RNA的表達水平。 結(jié)果: 1、成功建立了SD大鼠支氣管哮喘模型。 2、A組大鼠支氣管管壁及周圍肺組織無明顯炎性細胞浸潤；B組大鼠支氣管管壁及周圍肺組織有大量炎性細胞浸潤；C組大鼠支氣管及周圍肺組織病理改變較B組大鼠明顯減輕。 3、B組大鼠BALF中細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞數(shù)、中性粒細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)高于A組(P＜0.05)；C組大鼠BALF中細胞總數(shù)、嗜酸性粒細胞數(shù)、中性粒細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)低于B組(P＜

4、0.05)。 4、B組大鼠BALF中IL-4、NGF的水平較A組明顯升高(P＜0.01)，而IFN-γ水平則較A組有所下降(P＜0.05)；C組大鼠BALF中IL-4的水平較B組明顯下降(P＜0.01)，而IFN-γ水平變化不明顯(P＞0.05)。 5、3組大鼠肺組織中IL-4、IFN-γNGFmRaNA表達變化規(guī)律與BALF中IL-4、IFN-γ、NGF的變化規(guī)律一致。 6、B組大鼠BALF中NGF含量與細胞總

5、數(shù)、嗜酸性粒細胞數(shù)、淋巴細胞數(shù)呈正相關(guān)(r=0.833、0.944、0.949，P均＜0.05)；與IL-4含量呈正相關(guān)(r=0.944，P＜0.01)，與IFN-γ含量不相關(guān)(r=0.122，P＞0.05)；與肺組織中IL-4mRNA表達水平呈正相關(guān)(r=0.848，P＜0.05)，與IFN-γmRNA表達不相關(guān)(r=0.611，P＞0.05)。 結(jié)論: 1、用OVA生理鹽水溶液致敏和激發(fā)SD大鼠能夠成功復(fù)制出哮喘動物