慢性氟中毒對(duì)大鼠腦組織膽堿能毒蕈堿受體表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察慢性氟中毒大鼠及子代大鼠大腦膽堿能毒蕈堿受體(Muscarinic acetylcholine receptors，mAChRs，簡(jiǎn)稱(chēng) M受體)mRNA和蛋白表達(dá)變化及氧化應(yīng)激在慢性氟中毒大鼠腦損傷中的作用，探討其在慢性氟中毒性腦損傷及學(xué)習(xí)記憶能力降低發(fā)生機(jī)制中的作用。
　　方法：健康純系SD成年大鼠90只，體重100-200 g，隨機(jī)分為3組，每組30只，雌雄各半。包括對(duì)照組：自由飲用自來(lái)水，含氟量<0.5mg/L；染

2、氟組：飲水中加入氟化鈉，使含氟量為50mg/L；染氟-維生素E（Vitamin E，VE）拮抗組：飲水含氟量為50 mg/L，同時(shí)按50 mg VE/kg體重灌胃，每天一次，各組大鼠給予標(biāo)準(zhǔn)飼料，含氟量6.2mg/kg，試驗(yàn)期為10個(gè)月。選擇慢性氟中毒成年大鼠所生仔鼠50只，每組所生新生仔鼠由慢性氟中毒雌鼠母乳喂養(yǎng)，21日齡后各組飼養(yǎng)條件同成鼠，將仔鼠分1、7、14、21及28日齡五個(gè)階段。用Morris水迷宮方法檢測(cè)各組大鼠及28日齡

3、各組仔鼠行為學(xué)變化；觀察大鼠氟斑牙發(fā)生情況，用氟離子選擇電極法測(cè)定大鼠尿氟、骨氟含量；稱(chēng)取腦重；在光鏡下觀察大鼠大腦組織學(xué)形態(tài)改變，用尼氏染色觀察大鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)尼氏小體形態(tài)改變；用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、蛋白印跡及免疫組化方法分別檢測(cè)各組大鼠腦組織M1及M3受體mRNA及蛋白水平表達(dá)情況；用生物化學(xué)方法檢測(cè)大鼠血清、腦中丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量、超氧化物歧化酶(peroxide dismutase，SOD)

4、活性、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)活性以及腦組織勻漿中氧自由基(OH-、H2O2、O2·-)水平。
　　結(jié)果：染氟成鼠出現(xiàn)不同程度的氟斑牙，尿氟及骨氟含量高于對(duì)照組(P<0.01)，腦重低于對(duì)照組(P<0.05)；染氟成鼠學(xué)習(xí)記憶能力均不同程度降低(P<0.05)，光鏡下染氟成鼠皮質(zhì)及海馬各區(qū)神經(jīng)元沒(méi)有明顯改變，神經(jīng)元尼氏小體數(shù)量減少，染色變淺；染氟成鼠腦組織M1、M3受體mRN

5、A水平及蛋白表達(dá)水平均低于對(duì)照組(P<0.05)；染氟大鼠抗氧化水平降低，氧化應(yīng)激水平升高(P<0.01)，染氟-VE拮抗組較其有所改善。28日齡染氟仔鼠學(xué)習(xí)記憶能交對(duì)照組降低(P<0.05)，腦組織M1、M3受體mRNA水平及蛋白表達(dá)水平均低于對(duì)照組(P<0.05）。
　　結(jié)論：長(zhǎng)期攝入過(guò)量氟引起大鼠及子代大鼠腦組織M受體蛋白表達(dá)及mRNA水平降低，慢性氟中毒大鼠血清及腦組織氧化應(yīng)激水平升高，抗氧化能力降低，這些改變可能是氟中毒