S-腺苷蛋氨酸大鼠體內藥代動力學及其肝腸首過代謝定量評價.pdf

1、目的：腸道代謝能力在研發(fā)及制備口服生物制劑及新藥篩選中的作用日益受到人們的重視和關注。本實驗擬建立SAMe的大鼠血漿樣品HPLC-UV測定方法,并且通過IVAP模型研究SAMe腸道代謝過程,通過十二指腸、門靜脈及外周靜脈三種不同途徑分別給予不同劑量SAMe,定量評價SAMe肝臟和腸道首過代謝程度,并以CYP3A4及P-gp特異性抑制劑酮康唑及維拉帕米為工具藥,初步探討腸道CYP3A4及P-gp在SAMe腸道首過代謝中部分機制,為提高SA

2、Me口服生物利用度提供實驗依據(jù)。
　　方法：建立IVAP大鼠模型,經外周靜脈(70mg·kg-1,140mg·kg-1,280mg·kg-1)、門靜脈(70mg·kg-1,140mg·kg-1,280mg·kg-1)或十二指腸(140mg·kg-1,280mg·kg-1,560mg·kg-1)三種途徑給予高、中、低濃度的SAMe,分別于給藥前及給藥后0,1,10,20,30,40,60,90,120,180min經大鼠頸動脈取血0

3、.3mL,置肝素化試管中,10000r/min離心3min,分離血漿,-20℃保存待測,血漿樣品經處理后,HPLC-UV法測定血漿樣品中SAMe的濃度,采用DAS2.0藥動學軟件分析處理數(shù)據(jù),確定藥動學參數(shù),定量分析大鼠肝腸首過效應;并采取平行對照試驗,經十二指腸給予CYP3A4特異性抑制劑酮康唑(60mg·kg-1)以及P-gp特異性抑制劑維拉帕米(9mg·kg-1),比較酮康唑及維拉帕米對十二指腸(280mg·kg-1)及外周靜脈(

4、140mg·kg-1)兩種給藥途徑下SAMe藥代動力學影響。
　　結果：HPLC-UV法檢測大鼠血藥濃度,該方法專屬性好,靈敏度高,可靠性強,SAMe能完全分離,線性范圍:10～2000μg·mL-1,回歸方程為Y=30241X+256204,r=0.9991,日內精密度RSD分別為2.6％,3.6%,3.9%;日間精密度RSD分別為6.3%,4.9%,7.9%;回收率分別為107%,101%,98.3%。
　　IVAP模型

5、中,SAMe經不同途徑給藥后的藥動學參數(shù)AUC隨劑量呈比例關系增加,十二指腸給予三種不同劑量(140mg·kg-1,280mg·kg-1,560mg·kg-1)的SAMe,均在10min內達峰濃度,AUCid值分別為68.60±19.54mg·L-1·h,151.99±35.91mg·L-1·h,449.19±27.53mg·L-1·h,各劑量間的AUCid及Cmax均隨劑量的增加而增加,而其各劑量間Tmax,T1/2及CL值均無顯著性

6、差異;門靜脈給予(70mg·kg-1,140mg·kg-1,280mg·kg-1)SAMe后,AUCipv值分別為161.10±29.51mg·L-1·h,457.86±106.83mg·L-1·h,766.82±151.73mg·L-1·h,其AUC隨劑量的增加而的增加,而其各劑量間T1/2及CL值均無顯著性差異;外周靜脈給藥劑量同門靜脈,其AUCiv值分別為197.09±74.03mg·L-1·h,577.25±161.61mg·L

7、-1·h,939.10±164.43mg·L-1·h,其AUC隨劑量的增加而增加,而T1/2及CL值均無顯著性差異。外周靜脈及門靜脈給藥后,其AUCiv及AUCipv均隨劑量的增加而增加,但與同劑量的十二指腸給藥后AUCid比較,AUCid明顯低于AUCiv及AUCipv。經十二指腸預先給予酮康唑及維拉帕米預處理后,顯著增加id途徑下SAMe的AUC和Cmax值,但對SAMe靜脈藥動學參數(shù)無顯著性影響。經十二指腸給予(140、280mg

8、·kg-1)后,其絕對生物利用度分別為10.16±2.07%,17.77±5.41%;肝臟攝取率(EH)分別為18.73±2.42%,12.25±2.85%;腸道攝取率(EI)分別為84.82±3.74%,79.86±5.53%。
　　結論：1.本實驗方法在該線性范圍內專屬性好,靈敏度高,可靠性強,可用于SAMe藥動學分析。
　　2.腸道、門脈及外周靜脈給予不同劑量SAMe,均經歷了肝臟和腸道的代謝作用,經門脈及外周靜脈給藥