吉馬酮抑制肝癌Bel7402細(xì)胞增殖機(jī)制初步研究.pdf

1、莪術(shù)是藥用價(jià)值極高的中藥材,具有抗炎保肝,抗菌抗血栓形成,抗腫瘤的功效,在中醫(yī)臨床上有著廣泛的應(yīng)用。吉馬酮是從莪術(shù)中提取的一種倍半萜類化物,據(jù)報(bào)道有顯著的抑癌效果,但是其抗癌機(jī)理尚未完全揭示。本文以肝癌Bel7402細(xì)胞為研究材料,應(yīng)用MTT,Flow Cytometry,Western Blotting等方法研究吉馬酮對(duì)肝癌Bel7402細(xì)胞的增殖影響,主要研究結(jié)果包括以下幾個(gè)方面:
　　1.吉馬酮選擇性地抑制人肝癌Bel740

2、2細(xì)胞增殖,且呈現(xiàn)濃度依賴性,但是沒有明顯的時(shí)間依賴性。MTT比色法結(jié)果表明,吉馬酮能夠顯著抑制Bel7402細(xì)胞的增殖,且藥物濃度越高、其抑制作用越顯著,而24h與48h的抑制效果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,24h處理的半抑制濃度約為160μM,但同樣處理對(duì)正常肝細(xì)胞LO2沒有明顯的毒副作用。
　　2.吉馬酮?jiǎng)┝恳蕾囆缘卮龠M(jìn)人肝癌細(xì)胞Bel7402的凋亡和上調(diào)活性氧含量。通過Hochest染色和流式細(xì)胞檢測(cè),發(fā)現(xiàn)吉馬酮可以促進(jìn)Bel7402細(xì)

3、胞的凋亡,且藥物濃度越高,抑制作用越明顯。Western Blotting檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá),表明吉馬酮可以顯著促進(jìn)抑癌基因P53和Bax的表達(dá),抑制抗凋亡因子Bcl-2的表達(dá)。同時(shí)流式測(cè)定結(jié)果表明吉馬酮可以濃度依賴性地提高Bel7402的活性氧濃度。以上結(jié)果表明吉馬酮有促進(jìn)Bel7402細(xì)胞凋亡的效果并且涉及Bel7402細(xì)胞的氧化性損傷。
　　3.吉馬酮促進(jìn)Bel7402細(xì)胞凋亡是通過JAK2/STAT3信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)的。用

4、JAK2/STAT3信號(hào)通路的激動(dòng)劑白細(xì)胞介素IL-6和吉馬酮對(duì)Bel7402進(jìn)行不同處理后,Western Blotting檢測(cè)結(jié)果表明吉馬酮下調(diào)細(xì)胞中p-STAT3水平而IL-6上調(diào)p-STAT3水平,與此同時(shí),p-STAT3的下游抑癌基因P53的蛋白表達(dá)水平呈現(xiàn)相反變化。這些結(jié)果說明吉馬酮可以抑制Bel7402細(xì)胞中組成性激活因子STAT3的磷酸化,從而上調(diào)其下游基因P53的蛋白表達(dá)水平。
　　以上結(jié)果表明,吉馬酮有非常明顯