SP17、SPAG9、OY-TES-1基因在卵巢上皮性癌中的實時定量PCR表達及甲基化情況的研究.pdf

1、目的：檢測SP17、SPAG9、OY-TES-1這三種癌-睪丸抗原基因在卵巢上皮性癌與非卵巢癌中的qRealtime-PCR擴增基因表達及這三種基因在啟動子區(qū)域的甲基化情況，探討其與卵巢上皮性癌的關系。
　　方法：收集2015年1月至2016年4月于內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院行卵巢手術患者的新鮮卵巢組織共60例，其中有30例新鮮的卵巢上皮性癌組織標本，及30例新鮮的非卵巢癌組織標本。qRealtime-PCR實驗：從卵巢組織中提取RNA

2、，反轉錄為cDNA，運用SYBR實時熒光定量PCR技術對上皮性卵巢癌及非卵巢癌中的特定RNA序列進行定量分析。甲基化實驗：提取卵巢組織的DNA，運用DNA酸性亞硫酸鹽轉化、PCR擴增及PCR測序方法檢測SP17、SPAG9、OY-TES-1在卵巢上皮性癌與非卵巢癌中CpG島的甲基化差異性表達情況。qRealtime-PCR實驗數據應用2－△△CT進行處理后，應用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，采用兩獨立樣本t檢驗分析，P＜0.0

3、01有顯著性差異，具有統(tǒng)計學意義。檢測甲基化情況所得數據用SPSS19.0進行卡方檢驗或Fisher確切概率法進行檢驗，P＜0.05有統(tǒng)計學意義。
　　結果：⑴60例實驗標本中，最終上皮性卵巢癌及非卵巢癌組織標本中各有25例結果在有效分析范圍內；⑵SP17基因的RNA在卵巢上皮性癌中的表達高于其在非卵巢癌中的表達，差異有統(tǒng)計學意義(t=16.913，P＜0.001)；SPAG9基因的RNA在卵巢上皮性癌中的表達高于其在非卵巢癌中的

4、表達，差異有統(tǒng)計學意義(t=14.312，P＜0.001)；OY-TES-1基因的RNA在卵巢上皮性癌中的表達高于其在非卵巢癌中的表達，差異有統(tǒng)計學意義(t=15.976，P＜0.001)；⑶在25例上皮性卵巢癌中SP17、SPAG9、OY-TES-1基因啟動子區(qū)去甲基化發(fā)生率分別為：56％（14/25）、52%（13/25）、44%（11/25）；在25例非卵巢癌中SP17、SPAG9、OY-TES-1基因啟動子區(qū)去甲基化發(fā)生率分別為

5、：12%（3/25）、16%（4/25）、8%（2/25）；這三種基因的去甲基化表達情況在上皮性卵巢癌與非卵巢癌中相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；⑷SP17、SPAG9、OY-TES-1基因啟動子區(qū)去甲基化表達與上皮性卵巢癌患者的年齡、組織類型及分化程度無關（P＞0.05）；SP17、SPAG9、OY-TES-1基因啟動子區(qū)去甲基化表達與上皮性卵巢癌患者的淋巴結轉移有關（P＜0.05）；SP17、SPAG9基因啟動子區(qū)域去甲基化表

6、達與上皮性卵巢癌患者的臨床分期有關（P＜0.05），而OY-TES-1基因啟動子區(qū)域去甲基化表達與其臨床分期無關（P＞0.05）。
　　結論：①SP17、SPAG9、OY-TES-1基因的RNA在卵巢上皮性癌中的表達高于其在非卵巢癌中的表達，聯合檢測SP17、SPAG9、OY-TES-1基因在上皮性卵巢癌患者中的RNA表達水平，可以提高上皮性卵巢癌診斷地靈敏性，有望成為診斷上皮性卵巢癌有效生物學標志物。②在上皮性卵巢癌患者中SP1

7、7、SPAG9、OY-TES-1基因啟動子區(qū)去甲基化表達率高于其在非卵巢癌患者中的表達；SP17、SPAG9、OY-TES-1基因啟動子區(qū)在上皮性卵巢癌中激活，可能參與癌癥的發(fā)生、發(fā)展及轉歸；③③SP17、SPAG9、OY-TES-1基因啟動子區(qū)去甲基化表達與上皮性卵巢癌患者的淋巴結轉移有關；SP17、SPAG9基因啟動子區(qū)域去甲基化表達與臨床分期有關，而OY-TES-1基因啟動子區(qū)域去甲基化表達與臨床分期無關；但這三種癌睪丸抗原均與上