Sonic hedgehog基因?qū)ΨN植體周圍骨缺損修復的影響.pdf

1、由于腫瘤、外傷、先天性疾病或嚴重的牙周炎等造成的牙槽骨缺損直接影響口腔修復重建。在牙槽骨骨缺損修復過程中，新生骨形成的速度、質(zhì)量和長期穩(wěn)定性與口腔種植義齒修復息息相關。自體骨或異體骨移植、屏障膜技術等傳統(tǒng)的治療策略，在修復牙槽骨缺損方面頗有成效。然而，新生骨組織仍然難以與原始骨相提并論?；蛟鰪娦凸墙M織工程策略因其高效、穩(wěn)定的促進骨再生，而受到越來越多的關注。骨代謝作用主要通過全身或局部的生長因子的調(diào)控。作為眾多成骨因子之中的一員，音猬

2、因子（Shh）能夠通過骨形成蛋白（BMP）及甲狀旁腺激素蛋白（PTHrP）等信號通路誘導間充質(zhì)干細胞向成骨細胞分化，并在骨再生修復過程中發(fā)揮著重要的作用。本研究擬通過基因增強型骨組織工程方法，利用Shh修飾的骨髓間充質(zhì)干細胞與磷酸三鈣骨移植材料復合于犬牙槽骨缺損模型中，評價Shh基因在牙槽骨缺損修復中的骨再生能力。方法是構(gòu)建攜帶Shh基因的慢病毒載體，犬骨髓間充質(zhì)干細胞常規(guī)分離培養(yǎng)后轉(zhuǎn)導Shh慢病毒載體。熒光實時定量聚合酶鏈式反應、蛋白

3、免疫印跡方法檢測外源Shh基因的表達情況，并通過檢測堿性磷酸酶活性及成骨相關因子的表達，體外評價Shh基因促骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的能力。繼而將轉(zhuǎn)基因細胞與β-磷酸三鈣材料復合，體外檢測三維培養(yǎng)條件對細胞生物學性狀、胞內(nèi)成骨因子水平的影響。最終將Shh基因增強型組織工程骨移植到犬下頜骨種植體周圍骨缺損區(qū)，分別于術后4周和12周通過影像學及組織形態(tài)學方法觀察Shh基因增強型組織工程骨對牙槽骨缺損修復的影響。研究結(jié)果顯示，Shh基因能夠有