LRP16基因在子宮內膜異位癥中可能作用的研究.pdf

1、子宮內膜異位癥是一種激素依賴性疾病，多發(fā)生于中青年婦女。其發(fā)病機制尚未被完全闡明，為多數(shù)學者接納的仍為子宮內膜種植學說，即認為子宮內膜細胞隨經血逆流至盆腔并種植、生長而發(fā)生EMS。新的觀點認為內異癥患者子宮內膜細胞的異位種植、侵襲和血管新生等類似惡性腫瘤的生物學行為是內異癥發(fā)生、發(fā)展的重要機制之一。以往的研究發(fā)現(xiàn)LRP16基因是一種具有雌激素依賴性的腫瘤相關基因，因此，本研究試圖通過探討在子宮內膜異位癥中LRP16基因與E-cadher

2、in、ER、PR之間的關系，來解釋四者在EMS發(fā)生發(fā)展過程中可能起到的作用。同時，本研究通過借助對乳腺癌MCF-7細胞中骨架蛋白F-actin的觀察，試圖解釋在EMS中，LRP16是否通過改變細胞骨架蛋白F-actin來介導內膜細胞的遷徙。本研究共分2部分： 一、LRP16、E-cadherin、ER與PR在子宮內膜異位癥的表達及其意義 目的：探討LRP16與E-cadherin、ER、PR在子宮內膜異位癥(EM)患者在

3、位和異位內膜中的表達。 方法：采用免疫組化SP二步染色法，對72例EM患者在位內膜和異位內膜中的LRP16和E-cadherin、ER、PR進行免疫組化染色。 結果：腺上皮細胞胞漿中LRP16在在位中的表達高于異位內膜(P＜0.05)；胞核中LRP16在在位和異位內膜中的表達沒有明顯差別；腺上皮細胞胞膜中E-cadherin在在位中的表達低于異位內膜(P＜0.05)。但在位和異位內膜中LRP16和E-cadherin的表

4、達不認為存在相關性(P＞0.05)。腺上皮細胞核中ER、PR在在位內膜中的表達高于異位內膜(P＜0.05)，異位內膜中PR的陽性表達高與胞核中LRP16(P＜0.05)，ER低于LRP16，且ER與胞核中LRP16存在相關性。在位內膜胞核中LRP16高與ER、PR(P＜0.05)。 結論：LRP16和E-cadherin、ER、PR在在位和異位內膜中的表達異?？赡芘cEM的發(fā)生發(fā)展有關． 二、免疫熒光方法觀察LRP16蛋白

5、表達不同的細胞系中F-actin的情況 目的：探討表達不同LRP16蛋白的三種細胞系，即MCF-7細胞系、MPL-374細胞系及MPL-GFPi細胞系中F-actin的情況，進而分析LRP16蛋白、F-actin與細胞遷移間的關系。 方法：采用免疫熒光方法。用F-actin特異性FITC-phalloidin熒光染料，對三種細胞進行染色，觀察三種細胞間的不同。 結果：FITC-halloidin標記過的LRP16

6、基因表達抑制率為90％的MPL-374細胞、陰性對照的MPL-GFPi細胞中，細胞膜內側、細胞的拉絲處及細胞的毛刺狀突起處，可見較強的綠色熒光；而對于穩(wěn)定表達LRP16基因的MCF-7細胞，其細胞膜內側、細胞的拉絲處及細胞的毛刺狀突起處，綠色熒光的強度明顯減弱。 結論：LRP16基因的高表達可促進F-actin的解聚，使F-actin向G-actin轉化。三種細胞形態(tài)未見明顯不同，可推測F-actin的解聚不足以引起MCF-7細

7、胞內G-actin與F-actin轉化平衡的失衡。而MCF-7細胞中LRP16基因的高表達導致F-actin向G-actin轉化的變化，引起細胞拉絲的改變，可能導致細胞間相互作用的改變，從而使得細胞易于發(fā)生遷移。 全文結論： 1、LRP16在胞漿和胞核同時有表達，且異位內膜胞漿中LRP16的表達低于在位內膜，而在位內膜胞漿中的表達高于胞核中。 2、異位內膜腺上皮細胞胞核中LRP16的陽性表達高與E-cadheri

8、n，而在位內膜中無差別，同時，當LRP16在胞核中著色時，異位與在位間的表達無明顯差別，異位內膜中E-cadherin的表達明顯高于在位內膜，由此可推測，在在位內膜中存在LRP16與E-cadherin表達呈負相關的趨勢。ER與PR在在位與異位內膜中的不同表達，以及與LRP16表達的異常，提示它們之間可能存在著一定的相互關系，通過相互作用導致彼此的表達變化，從而在子宮內膜異位癥的發(fā)生中起作用。 3、MCF-7細胞中LRP16基因