二烯丙基二硫誘導鼻咽癌CNE2細胞凋亡的分子機制.pdf

1、目的：采用基因芯片方法分析二烯丙基二硫（diallyl disulfide, DADS）誘導鼻咽癌CNE2細胞凋亡相關基因，初步探討DADS誘導CNE2細胞凋亡的分子機制。
　　方法：采用MTT法檢測DADS抑制CNE2細胞增殖的IC50值；細胞生長曲線分析DADS對CNE2細胞生長的抑制作用；Hoechst染色法、流式細胞術及DNA凝膠電泳法，檢測DADS誘導CNE2細胞凋亡的情況；采用基因芯片，檢測DADS誘導CNE2細胞凋亡

2、相關基因；RT-PCR和Western blot驗證基因和蛋白的表達情況。
　　結果：
　　1、DADS抑制CNE2細胞增殖的IC50值為30mg·L-1；隨著DADS濃度增加，處理時間延長，CNE2細胞抑制明顯增加（P<0.05）。
　　2、Hoechst染色結果顯示，用30mg·L-1 DADS可誘導CNE2細胞中出現典型的凋亡形態(tài)學改變。
　　3、流式細胞術結果顯示，隨著DADS濃度的升高，CNE2細胞的凋

3、亡率逐漸增加（P<0.05）。
　　4、瓊脂糖凝膠電泳結果顯示，隨著DADS濃度升高達到30mg·L-1時，可見DNA梯形條帶。
　　5、基因芯片共檢測出1074個差異表達基因，其中與細胞凋亡相關基因24個（上調基因19個，下調基因5個）。
　　6、RT-PCR和Western-blot結果證實上調基因SON和下調基因IL24與基因芯片檢測結果基本一致。
　　結論：
　　1、DADS可誘導CNE2細胞凋亡。