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文檔簡介
1、MdHB1是一個轉(zhuǎn)錄因子,屬于蘋果HD-ZipI亞家族的成員,根據(jù)先前的報道,MdHB1能夠與MdACO1啟動子結(jié)合,進而調(diào)控乙烯生物合成。本試驗以‘皇家嘎啦’葉片為試材,克隆MdHB1基因啟動子,然后以煙草為材料,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瞬時轉(zhuǎn)化技術(shù)來探究蘋果MdHB1基因啟動子的特性。本試驗結(jié)果如下:
1、克隆了長度為1057bp的MdHB1基因啟動子,利用生物信息學(xué)軟件對MdHB1基因啟動子進行轉(zhuǎn)錄起始位點和順式作用元件的分析,
2、結(jié)果顯示轉(zhuǎn)錄起始位點(TSS)、CAAT BOX、TATA BOX分別位于翻譯起始位點(ATG)上游266bp、319bp、308bp的位置。在這一段基因啟動子區(qū)域內(nèi)存在響應(yīng)激素和環(huán)境因素的順式作用元件,如ERE、ABRE、ARE、G-Box等。
2、啟動子5,端序列缺失試驗表明,當(dāng)啟動子長度為680bp時,活性最低,當(dāng)啟動子長度為266bp時,仍具有較高的啟動子活性。5'UTR(非編碼區(qū)域)在基因表達過程中可能起到一個積極的
3、作用。
3、通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的瞬時轉(zhuǎn)化技術(shù),獲得含有長度為1057bp啟動子的轉(zhuǎn)基因煙草,在生物和非生物因素的處理下,啟動子受到乙烯、黑暗的正調(diào)控作用,而脫落酸(ABA)、水楊酸(SA)、假單胞丁香桿菌(DC3000)和機械傷對啟動子的正調(diào)控作用較微弱,赤霉素(GA)則抑制啟動子的活性。
4、乙烯響應(yīng)元件(距ATG上游576bp)能夠響應(yīng)外源乙烯正調(diào)控作用,當(dāng)外源乙烯處理濃度逐漸增大時,正調(diào)控效應(yīng)逐漸升高達到最大值,然
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