在膠質瘤干細胞中鞘氨醇激酶1對烷化劑敏感性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   應用誘導培養(yǎng)技術從人膠質瘤細胞系U87中誘導培養(yǎng)膠質瘤干細胞,分析其生物學活性。研究在膠質瘤干細胞中鞘氨醇激酶與烷化劑敏感性關系。應用鞘氨醇抑制劑誘導腫瘤干細胞分化增加烷化劑抗腫瘤效果,確定鞘氨醇激酶為膠質瘤治療的有效靶點。
   方法:
   通過誘導培養(yǎng)技術從人膠質瘤細胞系U87當中誘導培養(yǎng)膠質瘤干細胞。利用免疫熒光技術檢測膠質瘤干細胞球CD133和巢蛋白(Nestin)。應用MTT試驗檢測膠質

2、瘤干細胞和普通膠質瘤細胞對烷化劑藥物尼莫司丁(ACNU)的敏感性。應用定量PCR技術比較膠質瘤干細胞和普通膠質瘤細胞的鞘氨醇激酶1基因(SPHK1)表達差異。應用MTT試驗和流式細胞儀檢測在膠質瘤干細胞和普通膠質瘤細胞中應用鞘氨醇激酶抑制劑(SKI)增加腫瘤細胞對烷化劑藥物尼莫司丁(ACNU)敏感性。
   結果:
   試驗表明應用誘導培養(yǎng)技術可以培養(yǎng)出典型的膠質瘤干細胞球。通過MTT試驗檢測其對抗化療藥物的能力明顯高

3、于普通膠質瘤細胞。利用免疫熒光技術檢測到在膠質瘤干細胞出現(xiàn)CD133和Nestin熒光標記。通過定量PCR膠質瘤干細胞中鞘氨醇激酶1(SPHK1)基因表達明顯高于普通膠質瘤細胞。通過MTT試驗和流式細胞儀檢測,鞘氨醇激酶抑制劑(SKI)能夠明顯增加腫瘤細胞對烷化劑藥物(ACNU)敏感性。
   結論
   U87細胞中存在少量增殖、多向分化、抗烷化劑能力更強的膠質瘤干細胞。鞘氨醇激酶是一個治療腫瘤的有效靶點,通過應用鞘氨

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