GH-IGFs對人子宮肌瘤細胞體外生長的作用機理研究.pdf

1、目的：GH/IGFs參與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程，并影響著腫瘤的生物學行為，子宮肌瘤也表達GHR，同時已證實IGF-1和IGF-2是介導子宮肌瘤生長的重要介質，因此推測GH/IGFs在子宮肌瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中可能具有一定作用。本試驗通過觀察不同濃度rhGH、rhIGF-1及rhIGF-2對體外培養(yǎng)的子宮肌瘤細胞生長的影響，及其對GHR mRNA和IGB-1R mRNA的調節(jié)，初步探討了GH、 IGF-1和IGF-2對子宮肌瘤細胞生長的

2、作用機理。 方法：采用酶消化法進行子宮肌瘤細胞原代培養(yǎng)26例，培養(yǎng)成功11例，5例進行試驗。當培養(yǎng)的肌瘤細胞60％匯合時加入不同濃度（空白、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml）的rhGH，rhIGF-1及rhIGF-2，作用48小時后（1）在倒置顯微鏡下觀察細胞的生長情況；（2）采用流式細胞學技術測定細胞周期；（3）采用細胞原位雜交和圖像分析技術檢測GHR mRNA（rhGH）和IGF-1R mRNA（rhIGF-1

3、、rhIGF-2）表達的變化。 結果：1、GH、IGF-1和IGF-2對細胞增殖的影響：加激素48小時后發(fā)現(xiàn)GH10ng/ml，100ng/ml組、IGF-110ng/ml、100ng/ml組及IGF-2100ng/ml組，與對照組比較，細胞密度增加，GH組變化尤為明顯。與此一致，流式細胞檢測結果顯示，隨著GH、IGF-1濃度梯度的升高，S期細胞逐漸增多，而IGF-2組G2期的細胞數(shù)明顯增加，可見在體外GH、IGF-1及IGF-

4、2能夠促進子宮肌瘤細胞的蛋白合成和有絲分裂。2、細胞原位雜交顯示：（1）10ng/ml和100ng/mlGH作用后，GHR mRNA表達明顯高于對照組（P<0.01），且隨著濃度的升高表達增強，表明10ng/ml及其以上濃度的GH對GHR mRNA的表達具有升調節(jié)作用，而且具有劑量依賴關系。（2）不同濃度IGF-1對肌瘤細胞IGF-1R mRNA表達的影響：對照組肌瘤細胞IGF-1R mRNA的表達較高，10ng/ml和100ng/ml

5、濃度的IGF-1作用后，IGF-1RmRNA表達均明顯低于對照組（p<0.01），而且IGF-1的濃度越高IGF-1RmRNA表達降低越明顯。（3）不同濃度IGF-2對肌瘤細胞IGF-1R mRNA表達的影響：1ng/ml組和10ng/ml組與對照組比較，IGF-1R mRNA表達無差異（P>0.05），但100ng/ml組IGF-1R mRNA表達明顯降低（p<0.01）。 結論：（1）GH、IGF-1及IGF-2能夠促進子宮