高血糖對腦出血大鼠細(xì)胞凋亡及Bax、Bcl-2表達(dá)的影響.pdf

1、背景和目的
　　 腦出血(ICH)是一種威脅人類健康的急性疾病。許多研究認(rèn)為:細(xì)胞凋亡參與了神經(jīng)元的繼發(fā)性損傷,細(xì)胞凋亡是腦出血后神經(jīng)元損傷的重要因素之一。與非糖尿病患者相比,患糖尿病的腦出血患者在住院期間病情以及預(yù)后的狀況都相對較差。高血糖可能會促進(jìn)神經(jīng)元的凋亡并且已經(jīng)在缺血性腦血管病中得到證實(shí),而目前這方面在腦出血中的研究相對較少。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過建立高血糖大鼠腦出血動物模型,利用免疫組織化學(xué)和TUNEL方法,觀察

2、血腫周圍腦組織Bax、Bcl-2的表達(dá)和神經(jīng)細(xì)胞的凋亡；探討高血糖對血腫周圍腦組織Bax、Bcl-2表達(dá)和神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響,為腦出血的臨床治療提供理論依據(jù)。
　　 材料與方法
　　 健康成年雄性SD大鼠96只,隨機(jī)分為4組:假手術(shù)組、正常血糖組、高血糖組以及胰島素干預(yù)組。每組設(shè)4個時間點(diǎn):6h、24h、72h、7d。
　　 通過腹腔注射鏈脲菌素(STZ)制作高血糖動物模型,血糖值大>11.1mmol/L,認(rèn)為該

3、模型制作成功。
　　 在立體定向儀下于右側(cè)尾狀核區(qū)注入未凝自體動脈血建立腦出血動物模型。
　　 組織切片的制備:成功模型在相應(yīng)時間點(diǎn)灌注、取材,以注射針道為中心做冠狀切片。
　　 指標(biāo)檢測:Bax、Bcl-2的檢測是采用免疫組織化學(xué)染色。應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)測其免疫染色陽性區(qū)平均積分光密度,取其平均值；神經(jīng)細(xì)胞凋亡采用TUNEL法染色。凋亡指數(shù)(AI)=凋亡神經(jīng)元/總神經(jīng)元×100％。
　　 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:所有

4、數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,采用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,多組均數(shù)間的比較采用單因素方差分析,均數(shù)間的兩兩比較采用LSD檢驗(yàn),Bax與TUNEL的相關(guān)性采用直線相關(guān)分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1 Bax和Bcl-2表達(dá)的動態(tài)變化
　　 在假手術(shù)組紋狀體Bax和Bcl-2有少量表達(dá),從6h至7d變化相對較小。在正常血糖組、高血糖組以及胰島素干預(yù)組血腫周圍腦組織不同時間

5、點(diǎn)均有Bax和Bcl-2的表達(dá),且從6h逐漸增高,24h達(dá)峰,7d仍有表達(dá)。高血糖組大鼠腦血腫周圍組織Bax和Bcl-2的表達(dá)在相應(yīng)時間點(diǎn)明顯高于其它組(P<0.05),胰島素干預(yù)組上述指標(biāo)在相應(yīng)時間點(diǎn)均低于高血糖組(P<0.05),而高于假手術(shù)組,與腦出血組無明顯差別(P>0.05)。
　　 2神經(jīng)細(xì)胞凋亡的動態(tài)變化
　　 在假手術(shù)組紋狀體僅見少量的凋亡細(xì)胞,從6h至7d變化相對較小。在正常血糖組、高血糖組以及胰島素干

6、預(yù)組血腫周圍腦組織不同時間點(diǎn)均有凋亡細(xì)胞的表達(dá),且從6h逐漸增高,24h達(dá)峰,7d仍有持續(xù)存在。高血糖組大鼠腦血腫周圍組織凋亡細(xì)胞在相應(yīng)時間點(diǎn)明顯明顯高于其它組(P<0.05),胰島素干預(yù)組上述指標(biāo)在相應(yīng)時間點(diǎn)均低于高血糖組(P<0.05),而高于假手術(shù)組,與腦出血組無明顯差別(P>0.05)。
　　 3血腫周圍細(xì)胞凋亡與Bax表達(dá)的相關(guān)性結(jié)果
　　 高血糖組同一時間點(diǎn)的凋亡指數(shù)與Bax表達(dá)呈正相關(guān)性(r=0.80,P<