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1、目的:用BacT/ ALERT 3D法對(duì)脊柱結(jié)核不同治療時(shí)段、不同病灶組織中的標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng),聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本的耐藥基因,探討二種方法在脊柱結(jié)核診治中的價(jià)值。分析結(jié)核分枝桿菌在脊柱結(jié)核硬化壁中存在情況,從病原學(xué)角度出發(fā)為脊柱結(jié)核手術(shù)治療方法的改進(jìn)提供理論依據(jù)。
方法:(1)對(duì)符合本實(shí)驗(yàn)要求的53例初治脊柱結(jié)核患者的43例行手術(shù)治療,術(shù)中收集結(jié)核肉芽組織,膿液及病灶邊緣硬化骨作為標(biāo)本,分別接種于三個(gè)Ba
2、cT/ ALERT 3D液體培養(yǎng)基和三個(gè)羅氏培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),另10例患者抗癆治療前即行CT引導(dǎo)下膿腫或病椎穿刺后BacT/ Alert 3D法培養(yǎng),抗癆2周后術(shù)中取同樣標(biāo)本再行BacT/ Alert 3D法培養(yǎng)。陽(yáng)性者萋—尼抗酸染色鏡檢后,接種PNB和TCH培養(yǎng)基進(jìn)行菌種鑒定。(2)BacT/ ALERT 3D法陽(yáng)性標(biāo)本PCR-SSCP檢測(cè)異煙肼、鏈霉素耐藥基因katG和rpsl。
結(jié)果:(1)43例患者結(jié)核肉芽組織Bac
3、T/ ALERT 3D法和羅氏培養(yǎng)法培養(yǎng)的陽(yáng)性率44[%](19/43)、25[%](11/43),膿液BacT/ ALERT 3D法和羅氏培養(yǎng)法培養(yǎng)的陽(yáng)性率23[%](10/43)、9[%](4/43),BacT/ ALERT 3D法結(jié)核肉芽組織和膿液陽(yáng)性平均報(bào)告時(shí)間為16天19天,羅氏培養(yǎng)法結(jié)核肉芽組織和膿液陽(yáng)性平均報(bào)告時(shí)間為30天和27天,19例陽(yáng)性結(jié)果菌種鑒定后人型結(jié)核桿菌為18例,牛型結(jié)核桿菌為1例。另10例未抗癆治療的患者C
4、T引導(dǎo)下膿腫或病椎穿刺后BacT/ Alert 3D法培養(yǎng)陽(yáng)性率90[%](9/10)(均為人型結(jié)核桿菌),化療2周術(shù)中同樣標(biāo)本經(jīng)BacT/ Alert 3D法培養(yǎng)陽(yáng)性率為20[%](2/10)。(2)聚合酶反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性檢測(cè)11株結(jié)核分枝桿菌臨床分離株,耐異煙肼菌株2例,耐鏈霉素菌株4例。平均報(bào)告時(shí)間16小時(shí)和14小時(shí)。
結(jié)論:(1)BacT/ ALERT 3D結(jié)核分枝桿菌快速培養(yǎng)系統(tǒng)是臨床脊柱結(jié)核病原菌分離培養(yǎng)的
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