NF-κB在七氟烷預處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷作用機制的研究.pdf

1、目的： 1.觀察七氟烷預處理對在體大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用。 2.通過在七氟烷預處理前或后不同時間點給予核轉錄因子-κB(NF-κB)抑制劑小白菊內酯(Parthenolide，PTN)，探討NF-κB在七氟烷預處理保護機制中的作用。 3.通過Westem Blot技術蛋白半定量分析NF-κB在心肌缺血前和心肌缺血再灌注后的表達情況，探討NF-κB在七氟烷預處理保護機制中的作用地位。 方法：

2、 實驗一：48只雄性SD大鼠，隨機分為6組(n=8)。單純缺血組進行單純心肌缺血再灌注；PTN組于缺血前15min腹腔內注射NF-κB特異性抑制劑PTN 500μg／kg；DMSO組于心肌缺血前15min腹腔內注射PTN的溶劑二甲亞砜(DMSO)；七氟烷組于吸入1MAC七氟烷30min，繼之1 5min藥物排出；PTN+七氟烷組于七氟烷預處理前15min腹腔內注射PTN 500μg／kg；七氟烷+PTN組于七氟烷預處理后即刻腹腔內注射

3、PTN 500gg／kg。建立大鼠心肌缺血再灌注損傷的在體模型，阻斷左冠狀動脈前降支缺血30min，開放再灌注120min，實驗中監(jiān)測并記錄血液動力學變化，實驗結束用氯化三苯四氮唑(TPT)染色法測定左心室心肌梗死范圍。 實驗二： (一)心肌缺血前組：取42只雄性SD大鼠，隨機分為7組(n=6)，分為空白對照組、單純缺血組、七氟烷組、七氟烷165min組、PTN組、PTN+七氟烷組和七氟烷+PTN組，所有處理同實驗一，于

4、大鼠心肌缺血前取心肌標本，空白對照組即大鼠麻醉后不對采取任何手術和干預，于心肌缺血前的相應時間點取左心室心肌標本；七氟烷1 65min組吸入七氟烷30min后停止吸入1 65min(相當于七氟烷排除期1 5min．+心肌缺血30min+再灌注120min)取心肌標本。采用Western blot法測定NF-κB的蛋白表達。 (二)缺血再灌注后組：取42只雄性SD大鼠，隨機分為7組(n=6)。分為空白對照組、單純缺血組、七氟烷組、

5、七氟烷165min組、PTN組、PTN+七氟烷組和七氟烷+PTN組。所有處理同實驗一，分別于大鼠心肌缺血再灌注后或相應時間點取心肌標本。采用Western blot法測定NF-κB的蛋白表達。 結果： 實驗一：平衡期，各組間心率(HR)，平均動脈壓(MAP)和心率．收縮壓乘積(RPP)無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。七氟烷組、PTN+七氟烷組和七氟烷+PTN組在吸入七氟烷期間HR、MAP和RPP明顯降低，再灌注1 h和2

6、h引起各組MAP和RPP明顯降低(P<0.05)。與對照組(52.48+6.04)％相比，七氟烷組的心肌梗死范圍顯著減少(33.73±5.72)％，而PTN+七氟烷組(52.60±5.01)％和七氟烷+PTN組(52.39±7.00)％的心肌梗死范圍明顯高于七氟烷組(33.73±5.72)％(P<0.05)。 實驗二： (一)缺血前心肌標本比較：與空白對照組比較，七氟烷組NF-κB蛋白表達顯著增多(P<0.05)。

7、 (二)缺血再灌注后心肌標本比較：與空白對照組比較，單純缺血組NF-KB蛋白表達顯著增多(P<0.05)。與單純缺血組比較，七氟烷組NFq(B蛋白表達顯著減少(P<0.05)。 (三)缺血前和缺血再灌注后心肌標本比較：與缺血前單純缺血組相比，缺血后單純缺血組NF-κB蛋白表達顯著增多(P<0.05)；與缺血前七氟烷組相比，缺血后七氟烷組NF-κB蛋白表達顯著減少(P<0.05)。 結論： 實驗一：七氟烷預處理縮