姜黃素對Aβ25-35至PC12細胞損傷的保護作用.pdf

1、目的:本研究采用β-淀粉樣蛋白（Aβ25-35）致鼠腎上腺嗜鉻瘤細胞PC12(Rat pheochromoeytoma)損傷為AD模型，采用細胞形態(tài)學觀察及細胞活力檢測，應(yīng)用免疫熒光和免疫印跡技術(shù)檢測HMGB1在細胞的表達情況，探討HMGB1在AD病理過程中的重要性和干預(yù)價值，為姜黃素進一步用于AD患者提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。
　　 方法:取對數(shù)期生長的PC12細胞分為5組:正常細胞組（A組）、Aβ25-35模型組（B組）、姜黃

2、素Cur+Aβ25-35治療組（C組），rHMG1+Aβ25-35損傷組（D組），溶劑對照組DMSO+Aβ25-35（E組）。(1)A組不做任何處理;(2)B組加入終濃度為20μmol/L的Aβ25-35;(β)C組同時加入終濃度為20μmol/L的Aβ25-35和終濃度為1μmol/L的Cur共同孵育（姜黃素被溶解于1μl/ml DMSO）。(4)D組同時加入500ng/ml的HMGB1+20μmol/L的Aβ25-35.(5)E組同

3、時加入終濃度為20μmol/L的Aβ25-35和1μl/ml的DMSO，孵育24小時后進行細胞形態(tài)學觀察，細胞免疫熒光定性和Westem blot法檢測HMGB1等蛋白表達情況。
　　 結(jié)果:
　　 1、姜黃素可以減輕AD細胞毒性。與A組相比，B、D、E組細胞活力下降明顯;與B組相比，C組細胞抑制率降低，B組與D、E組相比，差異無統(tǒng)計學意義。
　　 2、姜黃素能夠降低HMGB1的表達。Western blot結(jié)果

4、顯示，與A組相比，B、D、E組細胞內(nèi)HMGB1表達升高;與B組相比，C組的HMGB1的表達下降，B組與D、E組相比，差異無統(tǒng)計學意義。
　　 3、姜黃素可能抑制HMGB1的胞外釋放。免疫熒光定性結(jié)果顯示，與A組相比，B組存在大量的HMGB1胞核外釋放情況;和B組相比，C組HMGB1的胞外釋放情況減少。
　　 結(jié)論:Aβ25-35引起PC12細胞毒性;姜黃素可減輕Aβ25-35引起的PC12細胞毒性;姜黃素可減少Aβ25-