三七總皂苷對(duì)大鼠心臟功能的毒性作用及對(duì)hERG鉀通道的影響.pdf

1、三七是五加科植物三七的干燥根，是我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥材。三七總皂苷(PNS)是三七的主要生理活性成分，廣泛地應(yīng)用于心血管疾病的治療。近年來(lái)，陸續(xù)有關(guān)于三七總皂苷藥源性食管炎，過(guò)敏性藥疹，過(guò)敏性休克等不良反應(yīng)的報(bào)道。本研究立足于PNS對(duì)心臟功能的影響，從體內(nèi)體外兩方面進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究以期了解可能存在的心臟毒性和不良反應(yīng)，探討PNS的安全劑量范圍。并按照國(guó)際協(xié)調(diào)組織ICH的要求觀察PNS對(duì)hERG電流是否有影響，重新評(píng)價(jià)它的臨床用藥安全性。

2、 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，于股靜脈給予不同濃度的三七總皂苷：17 mg·kg<'-1>、50 mg·kg<'-1>、150 mg·kg<'-1>、450mg·kg<'-1>及生理鹽水對(duì)照組，于給藥前及給藥后1、5、10、30、60 min記錄大鼠心率(HR)、平均動(dòng)脈壓(MAP)、左心室收縮壓(LVSP)、左心室壓最大上升速率(+dp/dt)、左心室壓最大下降速率(-dp/dt)隨時(shí)間變化情況。結(jié)果表明，PNS給藥劑量為450mg·kg<'-1>時(shí)

3、，大鼠心臟功能各項(xiàng)指標(biāo)迅速下降，全部實(shí)驗(yàn)大鼠均在10min內(nèi)死亡。可見(jiàn)三七總皂苷具有明顯的心臟毒性。PNS劑量小于或等于50mg·kg<'-1>時(shí)，各參數(shù)指標(biāo)均未見(jiàn)明顯改變，可視為PNS的用藥安全劑量，是臨床常用治療劑量的7倍。 體外實(shí)驗(yàn)采用原代培養(yǎng)的新生大鼠心肌細(xì)胞，采用MTT法觀察三七總皂苷對(duì)體外培養(yǎng)心肌細(xì)胞的毒性作用，并結(jié)合檢測(cè)LDH漏出綜合判斷細(xì)胞損傷。結(jié)果表明，三七總皂苷對(duì)原代培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞存在一定的毒性作用。在形態(tài)

4、學(xué)上，隨著給藥濃度的增加，心肌細(xì)胞出現(xiàn)搏動(dòng)消失，細(xì)胞膜受損，胞質(zhì)滲出，細(xì)胞死亡等損傷表現(xiàn)。MTT檢測(cè)表明，高劑量PNS對(duì)心肌細(xì)胞損傷明顯，PNS對(duì)心肌細(xì)胞半數(shù)抑制濃度為6.08 mg·kg<'-1>。PNS濃度增加到10 mg·kg<'-1>時(shí)，心肌細(xì)胞己全部死亡。三七總皂苷4、8、16 mg·kg<'-1>時(shí)，心肌細(xì)胞LDH漏出顯著增加，與空白對(duì)照組相比有顯著差異。 對(duì)hERG鉀離子通道轉(zhuǎn)染細(xì)胞進(jìn)行確證，Western Blo