睪酮介導(dǎo)的雄激素受體胞內(nèi)轉(zhuǎn)運的分子機制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、【背景】:雄激素及雄激素受體(Androgen receptor,AR)其對男性生殖功能和精子的發(fā)生至關(guān)重要。細胞膜上的AR參與了雄激素的非經(jīng)典途經(jīng)作用,但是細胞膜上是否存在AR仍存在爭議,膜上AR的具體作用尚未完全明確。
  【目的】:探究雄激素介導(dǎo)的AR胞內(nèi)轉(zhuǎn)運分子機制。
  【方法】:使用蛋白免疫印跡(Western blot,WB)和免疫熒光技術(shù)驗證TM4(一種小鼠睪丸支持細胞系)在睪酮刺激后胞內(nèi)AR的定位改變。采用

2、磷酸化抗體芯片檢測參與AR膜轉(zhuǎn)運的蛋白磷酸化,運用各類蛋白激酶拮抗劑驗證并探究各蛋白激酶之間相互作用與AR膜轉(zhuǎn)運的關(guān)系。
  【結(jié)果】:生理濃度的睪酮(10 nM)可以引起TM4細胞質(zhì)中AR的快速向細胞膜轉(zhuǎn)運。我們進一步研究AR快速轉(zhuǎn)運機制,采用磷酸化抗體芯片,發(fā)現(xiàn)睪酮刺激引起MEK1/2(Ser217/221),Akt(Ser473)和Erk1/2(Thr202/Tyr204)等位點的快速磷酸化。抑制MEK和Akt信號通路可以阻

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