急性早幼粒白血病細胞分化過程中維甲酸信號轉(zhuǎn)導途徑的研究.pdf

1、上海交通大學博士學位論文急性早幼粒白血病細胞分化過程中維甲酸信號轉(zhuǎn)導途徑的研究姓名：潘曉蓉申請學位級別：博士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：童建華20090501上海交通大學醫(yī)學院博十!學位論文細胞分化中受維甲酸調(diào)控的基因網(wǎng)絡(luò)，我們對APL細胞株NB4在維甲酸作用前后的基因表達譜進行了比較，分離和克隆了一系列受維甲酸誘導的基因，RIGG就是其中之一。在未經(jīng)ATI認處理的NB4細胞中RIGG基因幾乎不表達，經(jīng)ATRA作用72小時后其表

2、達水平明顯上升。進一步的功能研究發(fā)現(xiàn)，RIGG可以通過上調(diào)p21和p27的蛋白水平，抑制細胞增殖，促進細胞分化。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)在沒有STATl蛋白存在的情況下，IRF9和STAT2可以發(fā)生相互作用，形成復(fù)合物，并與RIG—G基因啟動子序列中的ISRE元件結(jié)合，誘導RIGG基因的表達。在NB4細胞中，由于RIGG并不是ATRA直接的靶基因，ATRA對RIG—G的誘導表達首先從誘導靶基因IRF1開始，而IRF1又可以進一步使細胞內(nèi)IR

3、F一9和STAT2的蛋白水平上升，IRF9和STAT2形成的復(fù)合物才是激活RIG—G基因表達必需的、也是最基本的蛋白因子。此外，在這部分的研究中，我們還對一些APL患者骨髓細胞中的RIGG表達情況進行了檢測，不但發(fā)現(xiàn)ATRA在離體的新鮮APL細胞中也能上調(diào)ⅪGG的水平，而且發(fā)現(xiàn)RIGG基因表達水平的高低可能對臨床判斷藥物療效，監(jiān)測疾病進程具有一定的輔助參考價值。在本論文的第二部分中，我們對可能存在的一種新的維甲酸作用方式——非基因效應(yīng)作

4、用機制進行了初步的探討。大量證據(jù)已經(jīng)表明細胞的分化成熟是細胞內(nèi)多條信號轉(zhuǎn)導途徑相互作用的結(jié)果。有研究顯示，一些能使細胞內(nèi)cAMP含量升高的藥物，如腺苷酸環(huán)化酶的激動劑、磷酸二酯酶的抑制劑等，可大大增強ATRA對APL細胞分化的誘導效應(yīng)；反之，如果降低cAMP的含量，則會不同程度地抑制ATRA誘導分化APL細胞。這些現(xiàn)象說明APL細胞的分化成熟不但需要維甲酸通過核受體傳遞信號，也需要cAMP／PKA等胞漿信號途徑的參與。在研究ATRA的誘