分子標記在彩色獼猴桃和美味獼猴桃遺傳分析中的應(yīng)用.pdf

1、彩色獼猴桃(Actinidiadeliciosavar.coloris)為美味獼猴桃(A.deliciosavar.deliciosa)的紅心變種，數(shù)量稀少，十分珍貴，是中國特有的種質(zhì)資源，具有重要的育種價值。本研究采用RAPD技術(shù)和SNP技術(shù)對五個彩色獼猴桃材料‘紅美’，TJ-DA-19，TJ-DA-54，TJ-DA-75和Ckou-DA-18進行遺傳分析，并選取三個有代表性的美味獼猴桃品種‘川獼1號’、‘秦美’和‘海沃德’作為參照，

2、研究彩色獼猴桃與美味獼猴桃的遺傳差異，以期為合理利用彩色獼猴桃種質(zhì)資源以及選配雜交育種親本、選育紅色性狀穩(wěn)定的彩色獼猴桃新品種提供理論依據(jù)。試驗結(jié)果如下： (1)從120個隨機引物(分別來自A、C、D、H、J、S組)中篩選出擴增效果較好的引物18個。18個引物對8個材料共擴增出242條帶，其中具多態(tài)性的帶有206條，占85.1％。各引物擴增的條帶數(shù)在5～18條不等，平均每個引物擴增出的條帶數(shù)為13.4條。聚類分析表明，三個美味獼

3、猴桃品種和五個彩色獼猴桃材料并不是分別聚在一起，而是交叉聚類，說明了彩色獼猴桃和美味獼猴桃遺傳關(guān)系的復(fù)雜性。材料間的平均遺傳距離為0.397，‘紅美’與TJ-DA-54的遺傳關(guān)系最近，遺傳距離為0.180；‘秦美’與CKou-DA-18遺傳關(guān)系最遠，遺傳距離為0.650。本文結(jié)合RAPD分析結(jié)果與各材料的主要形態(tài)指標和原產(chǎn)地進行了討論。 (2)根據(jù)細胞色素C合成酶基因的保守序列設(shè)計引物ccb203F：5'-ASGTTCTACGG

4、ACCGATGCC-3'和ccb203R：5'-CACGGGGAGGGAGCRGGCGA-3'分別對8個材料的基因組DNA進行了PCR擴增，經(jīng)克隆測序均為512bp。序列分析表明，在10個位點出現(xiàn)核苷酸多態(tài)性，多態(tài)性比率為1.95％，8個供試材料共有6種基因型(haplotype)，從細胞質(zhì)基因水平反應(yīng)了彩色獼猴桃的遺傳多樣性。SNP進化聚類圖與RAPD分析的結(jié)果一致，表明彩色獼猴桃和美味獼猴桃并沒有明顯分開而是交叉重疊。雖然SNP和R

5、APD在具體的個體間聚類存在一定的差異如‘紅美’和‘海沃德’聚為一組，TJ-DA-75和‘秦美’聚為一組，但SNP和RAPD聚類也具有相似性，即TJ-DA-54、‘川獼1號’和TJ-DA-19聚為一組，而且都表明CKou-DA-18是一特殊類型，因它既沒有和彩色獼猴桃聚在一起，也沒和美味獼猴桃聚在一起。本文討論了SNP和RAPD結(jié)果出現(xiàn)一定差異的原因。 (3)在SNP分析中，通過引物ccb203F和ccb203R擴增時發(fā)現(xiàn)一條特