EGFR、TGF-α和PCNA在甲狀腺乳頭狀癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、甲狀腺癌是頭頸部常見的惡性腫瘤，其中甲狀腺乳頭狀癌約占甲狀腺癌的70％-80％，濾泡狀癌約占10％-25％，其他類型不足10％。甲狀腺乳頭狀癌雖手術治療后五年生存率較高，預后較好，但其淋巴結轉(zhuǎn)移能力極強，且易侵犯頸動脈鞘及喉返神經(jīng)周圍淋巴結，增加手術操作的難度，且甲狀腺癌的發(fā)生率近年呈上升趨勢，因此尋求有助于提示甲狀腺乳頭狀癌轉(zhuǎn)移程度及預后的生物學指標尤為重要。 表皮生長因子受體家族及其相關配體是調(diào)節(jié)正常細胞生長的重要信號系統(tǒng)，

2、此系統(tǒng)的紊亂可導致細胞的惡性轉(zhuǎn)化?，F(xiàn)已證明在一些惡性腫瘤中存在表皮生長因子受體家族及其配體所形成的自/旁分泌環(huán)的異常，提示這一系統(tǒng)在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中占有重要的地位。 表皮生長因子受體家族包括c-erbB-1，c-erB-2，c-erB-3，c-erB-4四個成員，其中表皮生長因子受體是由原癌基因c-erbB-1基因編碼的單鏈跨膜糖蛋白，EGFR廣泛分布于哺乳動物的上皮細胞，單一的疏水跨膜錨著序列將細胞外配體結合區(qū)同細胞內(nèi)編碼的酪

3、氨酸蛋白激酶區(qū)分隔，酪氨酸蛋白激酶的活性對細胞的增殖分化起重要的作用。胞外配體結合區(qū)誘導兩個分子的配體結合形成二聚體復合物，這個過程引起了下游酪氨酸蛋白激酶的活化，從而激活多種級聯(lián)信號轉(zhuǎn)導系統(tǒng)，使基因轉(zhuǎn)錄增加。 TGF-α屬于表皮生長因子家族中的一個成員，在人類及多種哺乳動物均可合成，其通過自分泌、旁分泌或內(nèi)分泌作用于局部或距離較遠的組織和器官。TGF-α通過自分泌作用使細胞獲得了生長的自我刺激功能，這種作用能部分解釋腫瘤細胞失

4、去控制而無限生長的現(xiàn)象，這種現(xiàn)象歸結為內(nèi)在性自分泌生長調(diào)控環(huán)(intracrine loop)的作用；旁分泌功能是指細胞可以分泌調(diào)節(jié)肽并作用于鄰近細胞的生長調(diào)節(jié)形式，TGF-α誘導ca<'2+>釋放及腫瘤組織的血管發(fā)生，旁分泌作用有利于形成較大的腫塊和腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移；TGF-α也具有內(nèi)分泌作用。TGF-α除能與EGFR結合觸發(fā)細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導外，還能刺激IL-6產(chǎn)生，促進細胞增殖，誘導成纖維細胞表達增殖細胞核抗原，促進DNA的合成，使細胞增

5、殖。增殖細胞核抗原(Proloferating cell nuclear antigen，PCNA)是DNA多聚酶的輔助蛋白，存在于細胞核中，是一種僅在增殖細胞中合成和表達的36KD多肽，在DNA的合成中起重要作用。腫瘤細胞增殖活躍，DNA復制加速，PCNA表達明顯增強，其在細胞核內(nèi)陽性表達高低與細胞增殖活性密切相關，因此PCNA是一能較客觀反映細胞增殖活性的內(nèi)源性標志物。PCNA在增殖細胞中的含量變化有明顯的周期性，在G0-G1期基本

6、無表達，G1晚期開始大幅度增加至S中期達到頂峰，G2、M期迅速下降，M期及靜止期到最低水平。 本文檢測EGFR、TGF-α和PCNA在甲狀腺乳頭狀癌中的表達，探討EGFR、FGF-α和PCNA與甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及它們之間的相關性。 材料與方法 收集鄭州大學2005-2006年臨床資料完整的存檔蠟塊82例，全部標本均經(jīng)病理證實，所有病例術前均未進行放療、化療及內(nèi)分泌治療。其中甲狀腺癌47例(男10例，

7、女37例)，年齡13-72歲，平均年齡41.68±14.57歲，其中甲狀腺乳頭狀癌伴淋巴結轉(zhuǎn)移24例、甲狀腺乳頭狀癌不伴淋巴結轉(zhuǎn)移23例。甲狀腺腺瘤20例(男6例，女14例)，另取腺瘤旁正常甲狀腺組織標本15例為正常對照。臨床分期和病理分級依據(jù)國際抗癌協(xié)會聯(lián)盟(UICC)的TNM分期，，分為Ⅰ期29例，Ⅱ期12例，Ⅲ期5例，Ⅳ期1例。通過免疫組織化學S—P法染色，檢測所有標本中EGFR、TGF-α和PCNA的表達。統(tǒng)計學分析：采用SPS

8、Sl0.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結果 一、EGFR、TGF-α和PCNA在不同組織學類型中的表達EGFR染色位于細胞膜和細胞漿中，陽性表達物質(zhì)呈棕黃色。在PTC中EGFR的陽性率59.57％，顯著高于甲狀腺腺瘤25.00％和腺瘤旁正常組織6.67％(P<0.05)。 TGF-α染色位于細胞漿中，陽性表達物質(zhì)呈棕黃色。在PTC中TGF-α的陽性率55.32％顯著高于甲狀腺腺瘤20

9、.00％和腺瘤旁正常組織13.33％(P<0.05)。PCNA染色位于細胞核中，陽性表達物質(zhì)呈淡黃色或棕黃色。在PTC中PCNA的陽性率74.47％，顯著高于甲狀腺腺瘤45.00％和腺瘤旁正常組織13.33％(P<0.05)。 二、PTC中EGFR、TGF-α和PCNA與臨床資料及病理特征的關系EGFR的異常表達與甲狀腺乳頭狀癌的年齡、性別、病理分期無關(P>0.05)，與浸潤程度、淋巴結轉(zhuǎn)移有關(P<0.05)。TGF-α的異

10、常表達與甲狀腺乳頭狀癌的年齡、性別、浸潤程度、病理分期無關(P>0.05)，與淋巴結轉(zhuǎn)移有關(P<0.05)。PCNA的異常表達與甲狀腺乳頭狀癌的年齡、性別、浸潤程度、病理分期無關(P>0.05)，有淋巴結轉(zhuǎn)移組的PCNA的異常表達顯著高于無淋巴結轉(zhuǎn)移組(P<0.05)。 三、EGFR、TGF-α和PCNA三者之間的關系甲狀腺乳頭狀癌中EGFR與TGF-α的同時表達陽性者伴淋巴結轉(zhuǎn)移的陽性率84.21％，非同時表達陽性或共同陰性

11、表達28例，有8例有淋巴結轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)移率為28.57％，兩者有顯著性差異(P<0.05)。甲狀腺乳頭狀癌中EGFR與PCNA表達的相關性：47例甲狀腺癌中28例EGFR陽性者出現(xiàn)27例PCNA陽性表達，EGFR和PCNA的表達明顯呈正相關(P<0.05)。甲狀腺乳頭狀癌中TGF-α與PCNA表達的相關性：47例甲狀腺癌中26例TGF-α陽性者出現(xiàn)24例PCNA陽性表達，TGF-α和PCNA的表達明顯呈正相關(P<0.05)。 結論

12、 通過對82例不同病理類型的甲狀腺組織中EGFR、TGF-α和PCNA表達以及三者之間表達的相互關系的研究發(fā)現(xiàn)： 1．甲狀腺乳頭狀癌組織中EGFR、TGF-α和PCNA表達升高，提示EGFR、TGF-α和PCNA的異常表達可能參與甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生發(fā)展。 2．甲狀腺乳頭狀癌組織中EGFR和TGF-α的同時表達與淋巴結轉(zhuǎn)移密切相關，提示甲狀腺乳頭狀癌細胞表面可能存在有EGFR和TGF-α的自分泌環(huán)。 3．

13、甲狀腺乳頭狀癌組織中EGFR、TGF-α和PCNA表達均升高，呈正相關，提示三者對甲狀腺癌的發(fā)生可能起協(xié)同作用，可能通過對細胞增生水平的調(diào)節(jié)促進甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生。 4．對甲狀腺結節(jié)的穿刺取樣進行EGFR、TGF-α和PCNA蛋白聯(lián)合檢測，可能為甲狀腺癌早期診斷提供了理論基礎。EGFR和TGF-α的聯(lián)用，可能作為淋巴結轉(zhuǎn)移的評價指標。 5．以EGFR為受體的異常激活可能在甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用，針對EG