乙型肝炎病毒前C-C和前S-S基因異質性及其與宮內感染關系的初步研究.pdf

1、該研究運用分子生物學的技術方法，結合臨床與流行病學的資料，分析HBV基因的變異,初步篩選了可能與宮內感染有關的特異性基因結構，探討了HBV基因異質性與宮內感染的可能關系，從而為阻斷HBV的宮內傳播提供理論依據(jù).方法:①1997年8月~1995年5月和2001年8月~2002年1月收集陜西省婦幼保健院婦產(chǎn)科足月分娩的HBsAg陽性孕婦及其新生兒外周血,共70對.根據(jù)新生兒發(fā)生宮內感染與否,將其母親分為宮內感染組織和未感染組.同時還收集到1

2、例孕中期限引產(chǎn)的HBsAg陽性孕婦血清和引產(chǎn)胎兒肝臟.②提取血清中HBV DNA,擴增宮內感染組4對母嬰和未感染組5例母親HBV2.5kb或1.2kb基因片斷,PCR 產(chǎn)物純化后克隆入Puc19載體,經(jīng)PCR、酶切和測序鑒定,共得到63株HBV序列.③采用Megalign軟件對全部HBV株前C/C基因前S/S基因序列進行分析,確定基因亞型和血清亞型,構建種系進化樹,比較各基因區(qū)的差異性.④比較發(fā)生宮內感染的4對母嬰HBV序列間基因位點的

3、不同,基因差異性的高低以及種系進化關系.⑤分別比較宮內感染組新生兒和未感染組母親、宮內感染組母親和未感染組母親之間核苷酸序列、氨基酸序列的羞異.⑥護增引產(chǎn)孕婦HBV2.5kb基因片斷和引產(chǎn)胎肝中HBV S區(qū)500bp基因片斷,克隆后各選取一株母胎序列進行相似性分析,產(chǎn)同其它序列的變異位點進行比較.結論:①母體內的優(yōu)勢株和弱勢株都可以通過宮內傳播感染新生兒,可能是單株感染也可能是混合感染.母體的優(yōu)勢株和新生兒體內的優(yōu)勢株不一定相同.提示H