2型糖尿病大鼠模型骨骼肌脂肪組織GLUT4mRNA表達(dá)的研究.pdf

1、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(Glucose transporter-4,GLUT4)是一種跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，分布于對(duì)胰島素敏感的骨骼肌、脂肪、心肌組織中，作為葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)載體參與葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)活動(dòng)。大量研究表明，2型糖尿?。╰ype 2 diabetes,DM)的一個(gè)重要病理特征是對(duì)胰島素刺激的葡萄糖攝取的抵抗。GLUT4的表達(dá)及功能的改變可能與骨骼肌、脂肪組織的胰島素抵抗密切相關(guān)。本研究通過(guò)比較各組在骨骼肌、脂肪組織GLUT4 mRNA表達(dá)的差別與變

2、化，進(jìn)一步探索2型糖尿病發(fā)病的重要分子機(jī)制。 目的：研究2型糖尿病大鼠模型骨骼肌脂肪組織GLUT4mRNA表達(dá)的差異、變化及影響因素。 材料與方法： 1、材料：健康雄性Wistar大鼠33只，體重180-220g，由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物部提供。 2、高脂飲食的配制：在基礎(chǔ)大鼠飼料中分別以30％，10％，3％的比例加入豬油、白砂糖、雞蛋黃，加工制成高脂飼料。 3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理：將Wistar大鼠隨機(jī)分

3、為對(duì)照組10只，2型糖尿病組13只，高脂飲食組10只。對(duì)照組用普通大鼠飼料喂養(yǎng)10周；2型糖尿病組大鼠用高脂飼料喂養(yǎng)10周，第6周末注射小劑量STZ；高脂組用高脂飼料喂養(yǎng)10周。 4、生化項(xiàng)目的檢測(cè)：測(cè)定大鼠的血清總膽固醇，甘油三脂，LDL-C，HDL-C，空腹血糖；應(yīng)用放射免疫法檢測(cè)大鼠空腹血清胰島素水平。同時(shí)計(jì)算大鼠胰島素敏感指數(shù)。 5、反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)：應(yīng)用RT-PCR方法測(cè)定各組大鼠骨骼肌、脂肪組織GLUT4

4、mRNA的表達(dá)，用GLUT4和β-actin條帶的吸光度的比值代表GLUT4的相對(duì)表達(dá)水平。 6、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，組間比較采用方差分析。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1、各組大鼠體脂和血脂譜差異2型糖尿病組和高脂飲食組大鼠脂肪組織質(zhì)量及脂體比均顯著高于對(duì)照組(P均<0.01)。2型糖尿病組和高脂飲食組大鼠TG，TC和LDL-C均顯著高于對(duì)照組，(p均<0.01),HDL-C均低于對(duì)照組(P分別<0.0

5、1，<0.05)。 2、各組大鼠空腹血糖、空腹胰島素及胰島素敏感指數(shù)差異：2型糖尿病組和高脂飲食組發(fā)生高胰島素血癥(P<0.01)，胰島素敏感指數(shù)明顯降低(P均<0.01)。2型糖尿病組大鼠較對(duì)照組空腹血糖顯著升高(P<0.01)。而高脂飲食組空腹血糖較對(duì)照組無(wú)明顯差異。 3、各組大鼠骨骼肌和脂肪組織GLUT4mRNA表達(dá)及變化：各組大鼠骨骼肌組織GLUT4mRNA的表達(dá)高于脂肪組織。無(wú)論在骨骼肌組織，還是脂肪組織，2型