缺氧條件下HIF-1α調節(jié)CXCR4表達對骨肉瘤侵襲和轉移作用的研究.pdf

1、骨內間充質細胞的惡性轉化,導致骨肉瘤形成,但這一事件的遺傳基礎仍未被認識。從臨床角度講,大多數患者的原發(fā)性腫瘤可以得到成功地處理。然而,肺部轉移灶的形成是骨肉瘤患者死亡的最常見的原因。為降低腫瘤死亡率和改善預后,需要對其轉移的生物學特性有一個清晰的認識。既往研究表明,骨肉瘤的發(fā)生和演進往往與某些基因表達異常有關,通過調控這些基因可以誘導骨肉瘤細胞凋亡,從而使骨肉瘤生長和轉移受到抑制。
　　微環(huán)境缺氧是實體瘤的共同特征之一,而HIF

2、-1α是在缺氧條件下廣泛存在于哺乳動物和人體內的一種轉錄因子,其作為惡性腫瘤適應低氧微環(huán)境的核心調控因子,激活后可以調節(jié)多種基因的轉錄,在維持腫瘤細胞的無氧代謝,新生血管生成、促進腫瘤成活、生長和轉移過程中,均發(fā)揮很重要的作用。
　　CXCR4是趨化因子家族中的一個重要的信號分子,它與淋巴細胞轉運和造血細胞的成熟有關。CXCR4與其配體CXCL12(如被稱為基質細胞衍生因子或SDF-1)的相互作用可激活多種信號轉導通路,調節(jié)細胞的

3、增殖,存活,趨化,遷移和黏附。研究顯示:腫瘤內缺氧可通過CXCR4增加腫瘤細胞的侵襲,遷移和附著力。
　　基于HIF-1α和CXCR4在許多腫瘤中呈現高表達,且與腫瘤的侵襲與轉移密切相關,我們推測缺氧可能通過HIF-1α調節(jié)CXCR4,使得骨肉瘤細胞能適應缺氧微環(huán)境,來維持其存活、生長及轉移的潛能,從而對骨肉瘤的侵襲與轉移產生影響。
　　目的:細胞適應缺氧微環(huán)境對腫瘤的進展十分重要,主要是通過HIF-1α介導缺氧反應基因的協

4、同調控。已經證實趨化因子SDF-1α和其獨特的受體CXCR4與許多腫瘤的器官特異性轉移有關。在這項研究中,我們研究了HIF-1α和CXCR4在人骨肉瘤標本的表達,并探討缺氧狀態(tài)下HIF-1α調節(jié)CXCR4在骨肉瘤細胞中對細胞遷移過程的作用。
　　方法:我們運用免疫組織化學,免疫細胞化學,實時定量PCR,Western blot檢測分析和熒光報告基因,評估了人骨肉瘤組織標本及SOSP-9607細胞,在常氧條件及缺氧的條件下CXCR4

5、和HIF-1α的表達之間的相關性。運用Transwell小室法檢測,評估在不同條件下的細胞遷移能力。
　　結果:SOSP-9607細胞在缺氧條件下的遷移能力顯著提高。SOSP-9607細胞在缺氧條件下,CXCR4的mRNA和蛋白水平顯著增加的時間依賴性。此外,在缺氧條件下,siHIF-1α顯著下降CXCR4的mRNA及蛋白水平,在常氧條件,質粒pcDNA-HIF-1α顯著提高了CXCR4的mRNA和蛋白水平。熒光素酶報告基因研究表