骨髓間充質干細胞膜微粒對大鼠肺動脈高壓的免疫調控作用及機制研究.pdf

1、[目的]
　　通過間充質干細胞膜微粒(Mesenchymal stem cells-derived microparticles，MSC-MP)干預大鼠肺動脈高壓(Pulmonary artery hypertension，PAH)，探討其對PAH炎癥反應的免疫調控作用及其可能的機制。
　　[方法]
　　1.取2-3周齡SPF級SD大鼠的骨髓，全骨髓貼壁法培養(yǎng)骨髓間充質干細胞;流式細胞術行表面抗原鑒定、成骨成脂誘導分化

2、行功能學鑒定。低營養(yǎng)條件下誘導間充質干細胞(MSC)釋放膜微粒(MP)，低溫超速離心提取后行流式細胞術檢測表面抗原、透射電鏡行形態(tài)學檢查、BCA測定其蛋白濃度。
　　2.將SPF級SD大鼠分為三組:間充質干細胞膜微粒干預組（MP組），肺動脈高壓組（PAH組）和正常對照組(NOR組)，每組再按干預時間的長短分為兩個亞組即A組(14天)和B組(28天)。MP組和PAH組采取一次性腹腔注射野百合堿(MCT50mg/Kg)構建PAH模型，

3、MP組于造模第2天開始隔2日尾靜脈注射MPs30ug/只，NOR組及PAH組為注射等量生理鹽水;分別14天及28天后將2組大鼠測壓后處死.。
　　3.檢測各組大鼠右心肥厚指數(shù)(RV/LV+S)、肺小動脈管壁厚度指數(shù)(TI)、肺小動脈管腔面積指數(shù)(AI)、血管周圍炎癥評分(IS)、肺泡腔紅細胞滲出評分(ES)及組織纖維化評分(FS)。ELISA法檢測大鼠外周血血清及肺組織懸液趨化因子CX3CL1與CCL5以及炎癥因子促炎因子IL-1

4、、TNF-α與抑炎因子IL-10、TGF-β的表達水平。
　　[結果]
　　MPA組、PAHA組、NORA組平均肺動脈壓(mPAP)、平均右心室壓(mRVP)、RV/LV+S、TI、AI、FS均無明顯差異(P＞0.05);而MPB組與PAHB組相較，上述指標均低于PAHB組(P＜0.01)。MP組與PAH組比較，血管周圍炎癥評分(IS)及肺泡紅細胞滲出指數(shù)(ES)均低(P＜0.01); MP組大鼠的外周血血清及肺組織懸液中C

5、X3CL1及CCL5的水平亦顯著低于PAH組(P＜0.01); MP組促炎因子IL-1及TNF-α在血清及肺組織中的表達水平明顯低于PAH組(P＜0.01)，而抑炎因子IL-10及TGF-β的表達水平明顯高于PAH組(P＜0.01)，甚至高于NOR組(P＜0.05)。
　　[結論]
　　1.MSC-MP干預可以顯著降低肺動脈壓力，抑制血管周圍炎，減輕炎癥滲出，推測其對大鼠形成肺動脈高壓的進程中可起到免疫調控的作用。