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1、目的:研究堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、胰島素樣生長(zhǎng)因子(insuline-likegrowthfactor-I,IGF-Ⅰ)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)體外培養(yǎng)數(shù)代兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞Ⅱ型膠原表達(dá)的影響,探討傳代多次的軟骨細(xì)胞作為軟骨組織工程種子細(xì)胞的可行性。 方法:第3、5、7代體外培養(yǎng)的兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,經(jīng)b-FGF(1、5、10ng/ml)、IGF-Ⅰ(10、50、100ng/m
2、l)及bFGF(5ng/ml)+IGF-Ⅰ(100ng/ml)單獨(dú)刺激及聯(lián)合刺激為實(shí)驗(yàn)組,常規(guī)培養(yǎng)作為對(duì)照組行細(xì)胞爬片培養(yǎng),免疫組化法檢測(cè)Ⅱ型膠原的定性表達(dá),并通過(guò)圖像分析作半定量分析。 結(jié)果:對(duì)照組細(xì)胞第5代以后無(wú)Ⅱ型膠原陽(yáng)性表達(dá)。第3、5、7代軟骨細(xì)胞在不同濃度的bFGF或IGF-Ⅰ刺激下,Ⅱ型膠原表達(dá)強(qiáng)度顯著高于對(duì)照組(P<0.01);IGF-Ⅰ促進(jìn)各代細(xì)胞表達(dá)Ⅱ型膠原的作用顯著強(qiáng)于bFGF(P<0.01);bFGF和IG
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