EphA2基因和E-cadherin在腦膠質(zhì)瘤中的表達及其相關性研究.pdf

1、膠質(zhì)瘤（Gliomas）是顱內(nèi)最常見的原發(fā)性神經(jīng)上皮性惡性腫瘤，約占腦腫瘤的44.5%，其發(fā)病率高、容易復發(fā)是目前治療上的難題。近年來，隨著顯微外科的迅猛發(fā)展，手術醫(yī)生的經(jīng)驗積累，膠質(zhì)瘤的手術治療較以往有了很大幅度的提高，但由于膠質(zhì)瘤細胞呈浸潤性生長，加之出于手術風險及預后的考慮，所以目前很難達到在顯微鏡下完全切除腫瘤，從而遺留腫瘤復發(fā)的可能。放射治療、化學藥物治療有一定延緩腫瘤復發(fā)的作用，但其副作用大、耐受性差，而且效果一般欠佳，使其

2、在治療上受到一定的限制，諸多因素導致膠質(zhì)瘤患者術后復發(fā)率高、預后差，其中位生存期一般不超過12個月。因此，尋找有效的能提高膠質(zhì)瘤患者預后和生存質(zhì)量的治療措施迫在眉睫。 膠質(zhì)瘤是人類所罹患的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率高、預后差、死亡率高給無數(shù)幸福家庭帶來災難性的打擊，現(xiàn)有的研究已經(jīng)從多方面來認識和了解膠質(zhì)瘤，包括：癌基因與抑癌基因的發(fā)現(xiàn)，侵襲和生長機制的研究，放射治療及化學藥物治療的研究等，并取得了許多可喜的成績，而腫瘤的發(fā)生多是由于

3、細胞間信號傳導功能異常造成的細胞異常增殖或不能發(fā)生凋亡，從腫瘤的發(fā)生學上來尋找治療腫瘤的措施是目前的研究熱點。 受體型酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase，RTK）是蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosine kinase，PTK）中的一種，是外界刺激信息傳遞給細胞核，轉(zhuǎn)化成細胞效應的信號通路的關鍵組成，參與細胞生長、增殖、轉(zhuǎn)化及胚胎發(fā)育和腫瘤形成。各種刺激信息通過一系列信號傳導最終啟動絲裂原活化的

4、蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase MAPK）途徑的活化，促進細胞增殖和存活。MAPK途徑是介導細胞增殖、活化信號的一條重要途徑，許多細胞因子、生長因子及各種刺激下細胞反應等主要是通過此條途徑實現(xiàn)的。按照氨基酸序列和空間結構，受體型酪氨酸激酶可分為九類，Eph（Erythropoietin Producing Hepatocellular）樣RTK是其中的一個亞族，而EphA2（Erythropo

5、ietin Producing Hepatocellular A2）是Eph亞家族受體成員中被發(fā)現(xiàn)具有酪氨酸激酶活性的第1個基因編碼產(chǎn)物，是Lindberg于1990年用簡并引物從人角化上皮細胞在cDNA文庫中篩選得到的，人類EphA2基因定位于1p36.1。 研究發(fā)現(xiàn)：EphA2可以通過信號傳導參與胚胎發(fā)育，尤其是神經(jīng)系統(tǒng)及血管系統(tǒng)的發(fā)生和發(fā)育，調(diào)節(jié)細胞增殖、分化，維持細胞之間的粘附，促進血管的增生和調(diào)節(jié)血管的存活。而EphA

6、2異常表達時同樣可以通過信號轉(zhuǎn)導導致腫瘤的發(fā)生、血管生成、侵襲、浸潤和轉(zhuǎn)移。多項研究表明：在許多上皮來源的惡性腫瘤中，如：胃癌、肺癌、結腸癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等，EphA2都呈過表達，表明EphA2在惡性腫瘤中的表達具有共性，并且與腫瘤的病理分級，有無淋巴結轉(zhuǎn)移及預后密切相關，可能為惡性腫瘤治療的一個新靶點。EphA2在許多惡性腫瘤中呈高表達目前認為主要原因是：（1）.缺乏穩(wěn)定的細胞連接：在腫瘤組織中細胞與細胞、細胞與細胞基質(zhì)之間

7、缺乏穩(wěn)定的細胞連接，EphA2不能很好的與其配體正常結合而影響其磷酸化；（2）異常黏附：腫瘤細胞之間的黏附異?？梢詫е翬phA2及其配體異常定位并加重EphA2不能與其配體正常結合、啟動磷酸化，從而引起EphA2的積聚；（3）配體減少；（4）酪氨酸激酶的活化抑制EphA2的磷酸化。細胞粘附分子的表達減少或缺乏及異常黏附是目前認為導致EphA2不能正常和其配體結合而發(fā)生磷酸化、降解的主要原因[8，9，10]。 膠質(zhì)瘤是神經(jīng)上皮來源

8、的惡性腫瘤之一，研究表明：EphA2在膠質(zhì)瘤組織中也呈高表達[11，12]，并且與腫瘤的惡性程度及病理分級密切相關，而對于其與細胞黏附分子的研究及不同種類膠質(zhì)瘤組織中EphA2的表達目前暫未見相關研究報道。 E-鈣黏素即上皮性鈣黏蛋白（E-cadherin，E-cad），是一種常見的細胞黏附分子，于1995年由Berx首先克隆出來，是目前被公認的抑癌因子，其抑癌作用是E-cad通過介導細胞與細胞正常黏附，維持細胞結構的穩(wěn)定及細

9、胞間的正常信號傳導，使細胞能正常有序增殖、分化，避免細胞失控性生長，從而抑制腫瘤的形成來完成。 EphA2正常表達時可以調(diào)節(jié)細胞的黏附、運動，維持細胞骨架的穩(wěn)定，致正常的細胞信號傳導；而EphA2過表達時可加劇細胞與細胞之間的異常黏附，促進腫瘤的形成，加速腫瘤的侵襲、浸潤、轉(zhuǎn)移。國內(nèi)目前對于EphA2的研究尚處于起步階段，主要集中于其在惡性腫瘤中的蛋白及mRNA的表達，而對于其與細胞黏附分子的研究鮮見報道。研究表明：E-cad

10、是EphA2與細胞黏附分子作用中最常見的黏附分子，EphA2通過與E-cad的相互作用而影響細胞之間及細胞與基質(zhì)間的黏附。研究發(fā)現(xiàn)：在上皮細胞中，EphA2與E-cad協(xié)同定位于細胞間接觸位點，E-cad通過介導細胞正常黏附、調(diào)控EphA2與配體的正常結合與后續(xù)降解，從而調(diào)控EphA2的功能轉(zhuǎn)化及表達。E-cad缺乏或表達降低將影響EphA2受體與配體的表達和亞細胞定位，進而影響EphA2的降解及信號傳導。亦有實驗研究表明在諸如對肝癌、

11、胃癌、卵巢癌等惡性腫瘤的研究中，EphA2與E-cad的蛋白表達存在著明顯的負相關關系，共同起著對惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展、侵襲及惡性轉(zhuǎn)移的調(diào)控作用。但是，二者在人腦膠質(zhì)瘤中的表達及相互關系國內(nèi)尚無相關報道。本文用免疫組織化學的方法同時檢測不同級別、不同種類膠質(zhì)瘤組織中EphA2和E-cad的蛋白表達情況及在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用，從定性上明確二者之間是否存在相互關系，為進一步從事定量及作用機制上的研究提供證據(jù)。 目的:探討EphA

12、2與E-cad在人腦膠質(zhì)瘤及正常腦組織中的蛋白表達及臨床意義。 方法:采用免疫組化SP法同時檢測59例膠質(zhì)瘤組織和10例正常腦組織中EphA2和E-cad的蛋白表達。 結果: 1.59例膠質(zhì)瘤組織和10例正常腦組織中EphA2蛋白的陽性率分別為71.2%（42/59）和10%（1/10），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；膠質(zhì)瘤低級別組（Ⅰ、Ⅱ級）與高級別組（Ⅲ、Ⅳ級）EphA2蛋白的陽性率分別為33.3%（7/

13、21）和92.1%（35/38），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。 2.59例膠質(zhì)瘤組織和10例正常腦組織中E-cad蛋白陽性率分別為30.5%（18/59）和100%（10/10），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；膠質(zhì)瘤低級別組與高級別組E-cad蛋白陽性率分別為57.1%（12/21）和15.5%（6/38），差異有統(tǒng)計學意義（0.01

14、有顯著的差異。 4.42例EphA2蛋白表達陽性膠質(zhì)瘤組織標本中，有41例E-cad同時表達陰性，1例表達陽性；而18例E-cad表達陽性中，有17例EphA2表達陰性，1例表達陽性，EphA2與E-cad的蛋白表達呈負相關（P<0.01，rs=-0.454）。 結論: 1.EphA2在膠質(zhì)瘤組織中呈高表達；E-cad在膠質(zhì)瘤組織呈低表達；EphA2和E-cad的表達與膠質(zhì)瘤的病理學分級密切相關； 2.E