轉錄因子Oct4及Nanong在人乳腺癌干細胞中的表達及意義.pdf

1、腫瘤干細胞理論認為腫瘤是由腫瘤干細胞異常增殖、分化而形成,常規(guī)放化療僅能消滅增殖期的非致瘤性腫瘤細胞,使腫瘤縮小甚至消失,然而,腫瘤干細胞和普通干細胞一樣,對放化療等方法具有較高的抵抗能力,當治療停止后,腫瘤干細胞可再次增殖形成腫瘤。干細胞轉錄因子Oct4及Nanog參與胚胎干細胞和原始生殖細胞的自我更新,是維持細胞全能性所必須的轉錄因子,在分化或成熟的組織中其表達水平降低或消失。近來發(fā)現Oct4及Nanog在腫瘤組織中也有表達,且表達

2、水平與腫瘤的惡性程度相關。這與腫瘤中存在腫瘤干細胞的理論相一致,其在腫瘤干細胞中的作用有待研究。目前已證實乳腺癌中存在乳腺癌干細胞,并且乳腺癌干細胞在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展中起著關鍵作用。本實驗利用RNA干擾的方法研究轉錄因子Oct4及Nanog在乳腺癌干細胞中的作用。
　　 我們首先通過無血清培養(yǎng)法從乳腺癌MDAMB231細胞中分離出乳腺癌干細胞。通過研究其乳腺癌干細胞表面標志、抗化療藥紫杉醇的能力及在小鼠體內的致瘤能力,對其干細

3、胞特性進行鑒定。其次,通過Real-time PCR及WestenBlot等方法檢測其Oct4及Nanog的表達情況。隨后,我們利用siRNA分別下調乳腺癌干細胞中Oct4及Nanog的表達,并通過Real-Time PCR及Westen Blot等方法檢測干擾效果,探討Oct4與Nanog在乳腺癌干細胞中的相互作用,并利用CellTiter-Blue Cell Viability Assay檢測干擾后對乳腺癌干細胞抗化療藥能力的影響。

4、
　　 通過上述研究,我們發(fā)現在無血清培養(yǎng)基中存活下來的MDAMB231細胞比普通MDAMB231細胞具有較強的致瘤能力及抗化療藥紫杉醇的能力,具有乳腺癌干細胞的特性,下調乳腺癌干細胞中Oct4的表達會降低其Nanog的表達水平,同樣,下調乳腺癌干細胞中Nanog的表達也會減少其Oct4的表達水平,Oct4及Nanog的表達量減少均會導致乳腺癌干細胞的抗化療藥能力下降。本研究表明,轉錄因子Oct4及Nanog在乳腺癌干細胞中發(fā)揮