17-丙烯胺-17-去甲氧格爾德霉素對膽管癌細胞株QBC939生長周期及凋亡的影響.pdf

1、目的：探討熱休克蛋白90(HSP90)抑制劑17-丙烯胺-17-去甲氧格爾德霉素(17-AAG)對膽管癌細胞株QBC939生長的影響并對其相關機制進行初步探討。 方法： 1.應用MTT比色法觀察17-AAG對膽管癌細胞系QBC939細胞的生長抑制作用； 2.用流式細胞術分析經(jīng)17-AAG處理后QBC939細胞細胞凋亡及細胞周期的變化： 3.瑞特吉姆染色法觀察經(jīng)17-AAG處理前后細胞形態(tài)學變化；

2、4.細胞免疫組化檢測17-AAG處理前后QBC939細胞CDK1和C-e-rbB2的表達變化。 結果： 1.17-AAG能有效的抑制QBC939細胞的增殖，并呈時間、劑量依賴性，48h半數(shù)抑制濃度(IC50)為1.0umol/L：2.用0-1.0umol/l濃度的17-AAG作用QBC939細胞36h后細胞被阻滯于G2期，從11.90％±0.78％上升到40.33％±0.91％，并伴有S期細胞減少，差別有統(tǒng)計學意義(p<

3、0.05)； 3.經(jīng)不同濃度0、0.5、1.0、5.Oumol/117-AAG作用48h后檢測其細胞凋亡率，主要表現(xiàn)為早期凋亡分別為0.43％±0.35％、7.50％±2.59％、19.87％±5.06％、25.30％±2.85％，各實驗組與Oumol/117-AAG組比較，細胞凋亡率的差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05)； 4.瑞特-吉姆薩染色顯示，經(jīng)17-AAG作用后QBC939細胞胞質中出現(xiàn)空泡，細胞核出現(xiàn)扭曲變形及固

4、縮，出現(xiàn)較多的多核細胞，呈細胞凋亡的形態(tài)學改變； 5.17-AAG處理后的CDK1和C-erbB-2的蛋白表達明顯減少，平均光密度(AOD)的差異比較差別有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。 結論： 1.HSP90抑制劑17-AAG對膽管癌細胞系QBC939細胞的生長有明顯的生長抑制作用； 2.17-AAG通過抑制HSP90的分子伴侶功能，下調CDK1和C-erbB2表達，從而抑制細胞增殖，誘導細胞凋亡和周期阻