陡脈沖電場誘導腫瘤細胞凋亡及機理的研究.pdf

1、惡性腫瘤是一類嚴重威脅人類健康和生命的疾病,其基本特征就是癌細胞失控的增殖、侵襲和轉移。盡管目前已有多種癌癥的治療方法但是都不理想,國內外的專家對此進行了深入的研究和探討,提出了一種腫瘤治療的新方法,可以降低放、化療給病人帶來的痛苦,即利用高強度的脈沖電場刺激促使腫瘤細胞發(fā)生凋亡從而達到治療腫瘤的效果,這對腫瘤的治療有理論和實際的意義。本文的主要研究內容和結果如下:1.利用Annexin V-FITC凋亡試劑盒和流式細胞技術測定正常細胞

2、HL-7702和腫瘤細胞SMMC-7721在不同的參數(shù)的脈沖電場作用下的凋亡情況。結果顯示,脈寬1.8μs,強度超過200V/cm以上的脈沖電場可以誘發(fā)腫瘤細胞凋亡,正常細胞和腫瘤細胞隨電場強度的增加凋亡程度增大,同參數(shù)下腫瘤細胞的凋亡大于正常細胞。2.利用DNA Ladder試劑盒測定腫瘤細胞在不同參數(shù)電場作用下,DNA的變化情況。結果顯示,隨電場強度的增加腫瘤細胞DNA斷裂為更小的片段。3.利用Fluo-3染色,激光共聚焦顯微鏡實時

3、測定脈沖電場作用下細胞內鈣振蕩變化。結果顯示,脈寬1.8μs的電場作用下,腫瘤細胞胞內鈣離子濃度隨電場強度的增加降低幅度增大;同樣參數(shù)的電場作用,有胞外鈣條件下胞內鈣離子濃度的下降程度低于無胞外鈣條件下胞內鈣離子濃度的下降程度。4.利用羅丹明123染色,激光共聚焦顯微鏡實時測定脈沖電場作用下細胞線粒體膜電位變化。結果顯示,脈寬1.8μs的電場作用下,腫瘤細胞線粒體膜電位隨電場強度增大降低幅度增大。5.納秒級脈沖電場作用下,腫瘤細胞凋亡、

4、鈣振蕩和線粒體膜電位的變化情況。結果顯示,度600V/cm、脈寬120ns的電場作用下,腫瘤細胞無明顯凋亡;細胞外有鈣條件下,胞內鈣離子濃度略有下降。同脈寬1.8μs的電場相比強,細胞外無鈣條件下,該電場可使腫瘤細胞胞內鈣離子濃度降低幅度更大;線粒體膜電位的降低幅度更大。參考國內、外的相關研究成果,根據(jù)已有的理論和知識對實驗得出的結果進行分析和討論得出:脈沖電場可以誘導腫瘤細胞凋亡;脈沖電場作用下腫瘤細胞的凋亡可能是由胞內鈣離子濃度降低