趨化因子配體16在胰腺癌細(xì)胞株中的表達(dá)及對(duì)其生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的：探討趨化因子配體16(CXCL16)在胰腺癌組織和細(xì)胞系中的表達(dá),并研究其影響因素及外源性CXCL16對(duì)胰腺癌細(xì)胞系生物學(xué)行為的影響。
　　 方法：用免疫組化方法檢測(cè)30例胰腺癌及癌旁組織中CXCL16的表達(dá),并分析其與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及組織分化的關(guān)系。
　　 用逆轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PcR)和酶聯(lián)免疫吸附方法(EUSA)檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞系PANC-1和ASPC-1中CXCL16轉(zhuǎn)錄和翻譯水平的表達(dá)。

2、r>　　 細(xì)胞因子TNF-a、IL-1β在10、50、100、200ng/ml濃度下分別加入細(xì)胞系中,并用ELISA檢測(cè)CXCL16的分泌,不加TNF-a和IL-1β作為對(duì)照。另外,對(duì)比同時(shí)加入200ng/ml的TNF-a和IL-1β較單一因素對(duì)CXCL16分泌的影響。
　　 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的胰腺癌細(xì)胞系PANC-1和ASPC-1,分別加入50、100、200ng/ml的rhCXCL16和CXCL16中和性抗體,以不加rhCXC

3、L16作為對(duì)照組。采用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞增殖,采用Matrigel基質(zhì)膠檢測(cè)細(xì)胞的粘附率；采用Transwell小室檢測(cè)細(xì)胞侵襲和遷移能力。
　　 結(jié)果：CXCL16在80.00％的胰腺癌中表達(dá),僅在26.67％的癌旁組織中表達(dá)(P<0.005)。CXCL16的表達(dá)與TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(P<0.05),而與組織分化無關(guān)。
　　 CXCL16mRNA電泳條帶可以用RT-PCR方法檢測(cè)到。106/ml細(xì)胞

4、濃度下,PANC-1和ASPC-1的CXCL16OD值分別為215.3±14.9和170.0±11.6。
　　 TNF-a于200ng/ml濃度下,PANC-1和ASPC-1CXCL16OD值分別為460.3±46.4和421.5±44.6,顯著高于對(duì)照組的90.7±3.5和83.2±4.5(P<0.05)。IL-1β于200ng/ml濃度下,PANC-1和ASPC-1CXCL16OD值分別為421.5±44.6和367.7±4

5、6.0,顯著高于對(duì)照組的90.7±3.5和83.2±4.5(P<0.05)。TNF-a和IL-1β于200ng/ml濃度共同作用下,PANC-1和ASPC-1CXCL16OD值為481.2±50.0和433.34±45.0,與對(duì)照組無明顯差異。
　　 100ng/mlrhCXCL16處理PANC-1后,細(xì)胞增殖、粘附率、侵襲性和遷移性分別為0.227±0.021、(91.4±8.6)％、1.246±0.216、1.361±0.2

6、76,其中細(xì)胞對(duì)基質(zhì)的粘附率、侵襲性和遷移性顯著高于對(duì)照組的(20.6±3.2)％、0.259±0.013、0.199±0.008(P<0.05),對(duì)增殖性無顯著影響。200ng/mlrhCXCL16處理PANC-1后,細(xì)胞對(duì)基質(zhì)的粘附率、侵襲性和遷移性進(jìn)一步提高到(92.1±6.3)％、1.511±0.174、1.600±0.208(P<0.05)。100ng/mlrhCXCL16處理ASPC-1后,細(xì)胞增殖、粘附率、侵襲性和遷移性分

7、別為0.249±0.016、(89.9±6.7)％、1.646±0.200、1.596±0.211,其中細(xì)胞對(duì)基質(zhì)的粘附率、侵襲性和遷移性顯著高于對(duì)照組的(21.6±3.8)％、0.245±0.012、0.190±0.010(P<0.05),對(duì)增殖性無顯著影響。200ng/mlrhCXCL16處理ASPC-1后,細(xì)胞對(duì)基質(zhì)的粘附率、侵襲性和遷移性進(jìn)一步提高到(94.0±8.2)％、1.876±0.290、1.900±0.237(P<0.

8、05)。
　　 結(jié)論：CXCL16在胰腺癌組織中較癌旁組織顯著性高表達(dá),并協(xié)同癌的發(fā)展。
　　 在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上,PANC-1和ASPC-1存在CXCL16mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　 TNF-a和IL-1β可分別促進(jìn)細(xì)胞系分泌CXCL16,但二者聯(lián)合較單一因素并無顯著性增強(qiáng)。
　　 rhCXCL16可誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞系PANC-1和ASPC-1增強(qiáng)對(duì)基質(zhì)的粘附性、侵襲性和遷移性,但對(duì)增殖性無顯著提高作用