不同預處理方法對兔骨骼肌缺血再灌注損傷保護效應的實驗研究.pdf

1、目的：臨床上各種原因引起的骨骼肌缺血十分常見。缺血組織恢復血液灌注后，部分組織細胞功能代謝障礙及結(jié)構(gòu)破壞反而更重，這種血液再灌注使缺血性損傷進一步加重的現(xiàn)象稱為缺血-再灌注損傷(I/R)。而有學者發(fā)現(xiàn)短暫重復缺血，間斷再灌注的方法能夠提高組織缺血耐受性，這種方法稱為缺血預處理(IPC)。IPC提高組織對缺血的耐受性，減輕組織缺血再灌注損傷的作用已經(jīng)在不同實驗動物的不同器官、組織中得到證實。但是缺血預處理時間和循環(huán)次數(shù)并無統(tǒng)一標準，不同的

2、預處理方法對骨骼肌缺血再灌注損傷的保護作用是否有差別、何種缺血預處理方法能對骨骼肌缺血再灌注損傷的保護作用達到最大程度目前也尚無統(tǒng)一意見。 本研究模擬臨床氣囊止血帶的應用方法，建立兔后肢缺血再灌注損傷模型，觀察不同的缺血預處理方法(缺血間隔時間、間隔次數(shù))對骨骼肌缺血再灌注損傷的保護作用是否存在差別，以期發(fā)現(xiàn)何種預處理方法能使IPC保護作用最強。 方法：選擇體重2.2-2.7kg，新西蘭白兔56只，隨機分為I/R、A、B

3、、C、D、E、F組7組，每組8只。I/R組不行預處理。A組：進行2次5min間斷缺血，中間間隔2次5min間斷再灌流預處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復肢體血流。 B組：進行3次5min間斷缺血，中間間隔3次5min間斷再灌流預處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復肢體血流。 C組：進行4次5min間斷缺血，中間間隔4次5min間斷再灌流預處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復肢體血流。 D組：進行2次

4、10min間斷缺血，中間間隔2次10min間斷再灌流預處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復肢體血流。 E組：進行3次10min間斷缺血，中間間隔3次10min間斷再灌流預處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復肢體血流。 F組：進行4次10min間斷缺血，中間間隔4次10min間斷再灌流預處理，隨后持續(xù)缺血4h，最后松止血帶恢復肢體血流。 再用氣囊止血帶阻斷兔后肢血流4h，造成骨骼肌缺血再灌注損傷模型。測定再

5、灌注2h后兔血清中肌酸磷酸肌酶(CPK)和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)含量，肌肉干濕比。使用SPSS11.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析，各組數(shù)據(jù)均進行正態(tài)檢驗及方差齊性檢驗，以均數(shù)±標準差表示，不同預缺血時間、循環(huán)次數(shù)對骨骼肌缺血再灌注損傷的影響數(shù)據(jù)采用方差分析(ANOVA)，組間比較采用SNK-q檢驗。 結(jié)果： 1、血清中CPK、AST含量的比較I/R組和行預處理各組再灌注2h后動物血清中CPK和AST均有不同程度的升高

6、。I/R組再灌注2h后動物血清中CPK含量為9267.2±671.2，AST含量為246.7±18.2，較其它各組均高，差異有顯著性意義。E組再灌注2h后動物血清中CPK含量為4621.6±297.6，AST含量為117.6±8.6，較其它各組均低，差異有顯著性意義。相同的預缺血時間下，再灌注后2h，B組CPK(8414.5±634.4)，AST(156.8±11.3)含量較A組、C組低，E組CPK(4621.6±297.6)和.AST

7、(117.6±8.6)含量較D組、F組低，差異有顯著性意義。相同的預缺血循環(huán)次數(shù)下，再灌注后2h，D組CPK和AST含量小于A組，E組小于B組，F(xiàn)組小于C組，差異有顯著性意義。B組與F組，C組與D組相比差異無顯著性。 2、肌肉干濕比的比較再灌注后2h，與對照組相比各實驗組肌肉均有不同程度的水腫。I/R組再灌注2h后肌肉干濕比為0.163±0.016，較其它各實驗組均低，肌肉水腫程度最重，差異有顯著性意義。E組再灌注2h后肌肉干濕

8、比為0.2780±0.028，較其它各實驗組均高，肌肉水腫程度最輕，差異有顯著性意義。相同的預缺血時間下，再灌注后2h，B組肌肉干濕比較A組、C組高，E組肌肉干濕比較D組、F組高，差異有顯著性意義。相同的預缺血循環(huán)次數(shù)下，再灌注后2h，D組肌肉干濕比大于A組，E組大于B組，F(xiàn)組大于C組，差異有顯著性意義。B組與F組，C組與D組相比差異無顯著性。 結(jié)論： 1、IPC對骨骼肌缺血再灌注損傷具有一定的保護作用。 2、缺

9、血預處理5min對肌肉壞死即有保護作用，在相同的循環(huán)次數(shù)下預缺血10min效果較5min者好。缺血預處理2次循環(huán)對肌肉壞死即有保護作用，3次循環(huán)保護作用達高峰，而4次循環(huán)保護作用又相對減弱，但好于2次循環(huán)的保護效應。缺血預處理5min，4次循環(huán)與預處理10min，2次循環(huán)對骨骼肌保護作用無差別，缺血預處理5min，3次循環(huán)與預處理10min，4次循環(huán)對骨骼肌保護作用無差別。 3、IPC總的保護作用呈先逐漸增強再逐漸減弱的趨勢。預