BMP2轉染骨髓間充質干細胞修復羊股骨頭壞死.pdf

1、研究目的:評價Adv-hBMP-2基因轉染的BMSCs與TCP(磷酸三鈣)復合的組織工程化骨對羊股骨頭無菌性壞死的修復效果.材料與方法:1.掃描電鏡觀察TCP(磷酸三鈣)與羊骨髓間充質干細胞的復合情況:抽取羊骨髓行BMSCs培養(yǎng),取第2代BMSCs4皿與TCP材料復合,然后行掃描電鏡觀察.2.ELISA定量檢測細胞培養(yǎng)上清中BMP-2濃度:抽取羊骨髓行BMSCs培養(yǎng),分為3組:Ⅰ Adv-hBMP-2轉染細胞組;Ⅱ Adv-βgal轉染

2、細胞組;Ⅲ未轉染細胞組.分別在第1,4,7和10天定量檢測細胞培養(yǎng)上清中BMP-2濃度.3.建立股骨頭無菌性壞死動物模型:結扎羊的雙側旋股內、外側動脈,然后鉆孔將液氮灌入股骨頭.術后3周行大體形態(tài)、X線和組織學檢查.評價骨頭壞死情況.4.分組與治療:未治療組3只共6側,BMP-2治療組14側(右側)和β-gal治療組14側(左側).造模手術后3周植入或不植入細胞與TCP的復合物,手術后的不同時間進行大體形態(tài)、X線、組織學檢查(脫鈣切片和

3、四環(huán)素熒光標記)和生物力學測定.5.ELISA定量檢測組織工程化人工骨內BMP-2濃度:9只羊分為2組:Ⅰ BMP-2治療組(右側);Ⅱ βgal治療組(左側).先建立股骨頭壞死動物模型,在3周后植入BMP-2基因修飾的組織工程化人工骨,在植入后的第1,2和第3周分批處死動物將標本取出,并定量檢測其內BMP-2濃度.結論:BMSCs在轉染BMP-2基因后可以持續(xù)、有效的表達BMP-2,并有較強的誘導成骨能力.TCP在BMP-2基因給藥中