供體肺保存方法及移植后供體肺損傷機(jī)制的初步研究.pdf

1、改進(jìn)目前離體肺灌注模型,建立簡(jiǎn)單、可靠的肺移植實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,并應(yīng)用于研究供體肺的保存.該離體肺移植實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型能簡(jiǎn)單、可靠的模擬肺移植的循環(huán)過程,可用于肺移植及供體肺保存的研究.目前對(duì)供體肺保護(hù)的研究大多局限于改變保護(hù)液成份、保存溫度、充氣成份及狀態(tài)等方面,對(duì)于保護(hù)液灌注方法的研究較少.傳統(tǒng)的經(jīng)肺動(dòng)脈灌注保存液忽略了支氣管動(dòng)脈循環(huán)的重要性.本部分研究分別通過左房及肺動(dòng)脈灌注供體肺,比較兩種灌注方法對(duì)供體肺功能及結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用.經(jīng)左房逆行

2、灌注LPD液,對(duì)供體肺的保護(hù)效果優(yōu)于經(jīng)肺動(dòng)脈灌注;能在一定程度上減輕缺血-再灌注對(duì)供體肺的損傷.近來研究發(fā)現(xiàn),肺移植術(shù)后供體肺存在細(xì)胞凋亡致其細(xì)胞數(shù)減少;但移植后細(xì)胞凋亡對(duì)供體肺功能的影響目前尚未闡明;有研究表明抑肽酶對(duì)許多臟器移植有較好的保護(hù)作用,但其對(duì)肺移植的作用尚不明確;本研究應(yīng)用TUNEL-Fluorescein(TUNEL)及PI雙染的方法檢測(cè)供體肺移植前后細(xì)胞凋亡的動(dòng)態(tài)變化,明確肺移植后細(xì)胞凋亡與供體肺功能的關(guān)系,同時(shí)探討抑

3、肽酶經(jīng)不同的干預(yù)方式對(duì)供體肺功能的保護(hù)作用及對(duì)供體肺細(xì)胞凋亡的影響.抑肽酶經(jīng)不同方式干預(yù)均可獲得良好的供體肺保護(hù)效果,提高供體肺移植術(shù)后的肺功能;供體肺移植后早期發(fā)生不同程度的細(xì)胞凋亡;抑肽酶經(jīng)不同干預(yù)方式可抑制供體肺細(xì)胞凋亡的發(fā)生;供體肺移植后細(xì)胞凋亡指數(shù)與移植后供體肺功能呈負(fù)相關(guān),可能細(xì)胞凋亡是造成供體肺移植術(shù)后早期肺功能減低的原因之一.TRAR19(TF-1 cell apoptosis-related gene 19)是新發(fā)現(xiàn)的

4、一種凋亡相關(guān)蛋白,其核轉(zhuǎn)位要早于DNA片段化以及PS在細(xì)胞膜的再分布,提示在細(xì)胞凋亡的更早期,就已經(jīng)發(fā)生了TFAR19基因的轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá);TFAR19可作為檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的一個(gè)指標(biāo)或輔助檢測(cè)手段,觀察細(xì)胞凋亡更早期發(fā)生的事件.本部分研究在肺移植過程中不同時(shí)段應(yīng)用抑肽酶進(jìn)行供體肺的保護(hù),檢測(cè)TFAR19在供體肺移植過程中定位和表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化,為供體肺保存的干預(yù)手段及干預(yù)時(shí)機(jī)提供理論依據(jù).在正常肺組織中,TFAR19表達(dá)較弱,在細(xì)胞質(zhì)與