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文檔簡介
1、背景:
每年全世界數(shù)百萬嬰幼兒接受全身麻醉和手術(shù),但全身麻醉藥對神經(jīng)系統(tǒng)處于突觸爆發(fā)期的兒童智力是否有影響,還不清楚。新生動物使用全身麻醉藥麻醉后會出現(xiàn)多個腦區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡、突觸發(fā)育的異常和神經(jīng)退行性變,有些在成年后還會遺留神經(jīng)認(rèn)知或社交方面的障礙,其具體機制還不清楚。
目的:
通過實驗研究七氟烷對核糖體蛋白S6的影響及其對其上下游通路的信號分子的影響,以研究七氟烷對神經(jīng)系統(tǒng)作用的機制。
方法:<
2、br> 建立新生動物七氟烷吸入麻醉模型。選用P8的SD大鼠隨機分為兩組,麻醉組和氧氣對照組。以70%氧氣空氣混合氣為載氣,麻醉組大鼠給予七氟烷麻醉,分別在0.5h,1h,2h,4h取樣,當(dāng)麻醉持續(xù)4h后停止麻醉,將鼠仔放回母親身邊,并于放回后0.5h和2h分別取樣。另一組是氧氣對照組,直接使用70%空氣氧氣混合氣吸入。并在相同時間點取樣。一方面,取出新生大鼠的海馬和皮層組織,抽提蛋白行蛋白印跡實驗,進(jìn)行Caspase-3,rpS6,p
3、-rpS6,AKT,p-AKT,mTOR,p-mTOR,ERK,p-ERK,JNK,p-JNK,P38,p-P38檢測,以actin為內(nèi)參。另一方面將新生大鼠從左心室灌流,取腦切片,行免疫組化實驗,檢測Caspase-3和p-rpS6的表達(dá)分部狀況。此外,七氟烷麻醉4h和氧氣對照4h的新生大鼠剝?nèi)『qR和皮層,抽提RNA后送樣進(jìn)行基因芯片檢測,觀察七氟烷新生動物麻醉對海馬和皮層基因表達(dá)的影響。
結(jié)果:
七氟烷新生動物麻
4、醉4h后,在海馬和皮層均可見Caspase-3的表達(dá)上調(diào);給予新生大鼠七氟烷持續(xù)麻醉,會造成大腦皮層和CA1區(qū)明顯時間依賴性rpS6磷酸化的抑制;七氟烷能明顯抑制大腦皮層和海馬區(qū)的AKT活性,但對AKT的下游的mTOR沒有影響;七氟烷對海馬和大腦皮層的ERK活性產(chǎn)生了比較矛盾的效應(yīng);七氟烷增加了皮層和海馬的PP1的活性;基因芯片提示七氟烷麻醉對多種基因的表達(dá)產(chǎn)生了上調(diào)或下調(diào)的效應(yīng),這些基因中許多是由于神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育,認(rèn)知記憶密切相關(guān)的基因
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