混合造血干細胞移植治療鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡的實驗研究.pdf

1、【目的】
　　 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種嚴重威脅人類健康與生命的自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AD)。目前,造血干細胞移植(hematopoietie stem cell transplatation,HSCT)逐漸成為治療嚴重自身免疫病的有效方法之一。造血干細胞移植分為同種自體和異體造血干細胞移植。自體造血干細胞移植治療SLE的方法,雖然

2、短期緩解率尚可,但由于其自身的缺點,遠期復發(fā)率極高,因而臨床應用前景受限。異體造血干細胞移植,理論上可根治SLE,但存在配型困難,更為棘手的是難治性排斥反應,表現(xiàn)為移植物抗宿主病(GVHD)或宿主抗移植物病(HVGD)。經過近年來的不斷探索,特別是細胞免疫學和分子生物學的研究進展,提示采用同基因和異基因造血干細胞(hematopoietic stem cells,HSCs)混合移植有可能在重建免疫的同時誘導免疫耐受,從而避免或減輕排斥反

3、應。本研究擬探討純化同基因和異基因混合造血干細胞移植對排斥反應的防治作用以及治療狼瘡鼠的效果。
　　 【方法】
　　 36只MRL/lpr小鼠隨機分為同基因與異基因比例為1:5、1:10、1:15、異基因移植組,藥物組及對照組共六組,每組6只。各移植組受體鼠經鈷60γ線1.25放射源照射預處理。采集BALB/c小鼠與供體狼瘡鼠骨髓細胞,經lin-CD117+免疫磁珠法分選出小鼠的造血干細胞,按不同比例混合后,尾靜脈注射到

4、各移植組受體MRL/lpr小鼠。藥物組未經照射預處理,每天腹腔注射地塞米松Img/kg·d。未經任何處理的狼瘡鼠作為空白對照組。定性、定量分析小鼠尿蚩白。外周血白細胞、肌酐、尿素氮等檢測。ELISA檢測小鼠抗核抗體。腎組織病理切片,光鏡、電鏡、免疫熒光檢測MRL/lpr小鼠的腎臟病理變化。觀察小鼠的一般情況,移植相關的并發(fā)癥,死亡率。
　　 【結果】
　　 對照組尿蛋白定性平均在+++-++++,各移植組和藥物組平均++

5、左右。尿微量白蛋白在移植后4周降低,在移植后8周明顯減低。各移植組可在短時間內獲得造血重建。腎組織病理結果顯示,對照組腎小球新月體和(或)硬化改變重于藥物組和移植組,差異有顯著性(P＜0.05),藥物組病變較各移植組無顯著差異(P＞0.05),但體重下降、死亡率高于移植組。
　　 【結論】
　　 用混合造血干細胞治療狼瘡鼠,可以有效糾正和控制狼瘡鼠的大量蛋白尿,改善狼瘡鼠腎臟病變,與移植相關的并發(fā)癥、死亡發(fā)生率不高,是一