熒光原位雜交技術(shù)產(chǎn)前診斷非整倍體的研究.pdf

1、目的：探討熒光原位雜交(FISH)技術(shù)在產(chǎn)前診斷常見染色體非整倍體中的可行性與實(shí)用性，建立一種準(zhǔn)確、快速、適合臨床應(yīng)用的分子遺傳學(xué)方法，用于產(chǎn)前診斷常見染色體非整倍體，從而降低染色體病患兒出生率。 方法：采用GLP DLEU1/GLP DSCR2和CSP18/CSP X/CSP Y2組染色體特異性探針，對2008年3月～2008年7月在天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院產(chǎn)前診斷中心因DS血清學(xué)篩查高風(fēng)險(xiǎn)、孕20～25周的109例孕婦，在B超引導(dǎo)

2、下行羊膜腔穿刺術(shù)抽取羊水20mL，2～3mL未培養(yǎng)羊水直接用于FISH檢測，15mL羊水培養(yǎng)行羊水細(xì)胞染色體核型分析。FISH的診斷結(jié)果與核型分析結(jié)果進(jìn)行比較。 結(jié)果：1、核型分析109例羊水細(xì)胞培養(yǎng)均一次性成功。共檢出異常核型6例：3例47，XX，+21；1例45，X/46，XX的嵌合體；1例45，X/46，XY的嵌合體；1例47，XX，+mar；余103例均為正常核型(58例為46，XX；45例為46，XY)。2、FISH檢

3、測結(jié)果判斷：(1)第一組：DLEU1 DNA探針定位于13q14，雜交信號為綠色(FITC)；DSCR2 DNA探針定位于21q22，雜交信號為橘紅色(Rhodarnine)。二倍體在單個(gè)細(xì)胞核中13號染色體顯示為2個(gè)綠色信號，21號染色體顯示為2個(gè)橘紅色信號；若13-三體綜合征，顯示3個(gè)綠色信號；若DS顯示3個(gè)橘紅色信號。(2)第二組：CSP18探針定位于18p11.1-q11.1，雜交信號為天藍(lán)色(DEAC)；CSPX探針定位于Xp

4、11.1-q11.1，雜交信號為綠色(FITC)；CSP Y探針定位于Yp11.1-q11.1，雜交信號為橘紅色(Rhodamine)。二倍體在單個(gè)細(xì)胞核中18號染色體顯示為2個(gè)天藍(lán)色信號；正常男性X染色體顯示為1個(gè)綠色信號，Y染色體顯示為1個(gè)橘紅色信號；正常女性X染色體顯示為2個(gè)綠色信號，無橘紅色信號出現(xiàn)；若18-三體綜合征，顯示3個(gè)天藍(lán)色信號；若只顯示1個(gè)綠色信號提示為X染色單體。109例被檢羊水中有105例出現(xiàn)清晰的雜交信號并成功

5、分析得出結(jié)果，成功率為96.3％。染色體數(shù)目正常100例(58例為46，XX；42例為46，XY)，其中染色體數(shù)目正常中的99例與核型分析結(jié)果一致，1例FISH結(jié)果為46，XX，而核型分析為47，XX，+mar，由于標(biāo)記染色體來源不是13、18、21、X和Y染色體，故未能診斷。染色體數(shù)目異常5例(3例47，XX，+21；1例45，X/46，XX；1例45，X/46，XY)，與核型分析結(jié)果完全一致。FISH對于所有發(fā)現(xiàn)的非整倍體敏感性為8