Fas-FasL在小細胞肺癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文FasFasL在小細胞肺癌中的表達及其臨床意義姓名：宿杰申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導(dǎo)教師：田大力20040401實驗方法1免疫組化染色：①石蠟切片常規(guī)二甲苯脫蠟15分鐘(min)，梯度酒精脫水后，蒸餾水沖洗。②3％過氧化氫滅活10min③組織抗原修復(fù)，將切片放入500ml工作液中置微波爐中加熱后，取出室溫冷卻，PBS液(PH74)沖洗。④6％正常山羊血清封閉，室溫孵育10rain，傾去血清，滴加一抗4。C過

2、夜。⑤將切片從冰箱中取出，PBS沖洗，滴加生物素標記二抗，37。C孵育30mino@PBS沖洗，滴加第二代生物素標記三抗，37℃孵育30min。⑦PBS沖洗，DAB顯色劑顯色，取蒸餾水085mi按順序加入A，B，C各50ul混勻，取50ul滴加到切片上，顯色時間15—25秒⑧自來水充分水洗，蘇木素復(fù)染3rain，水洗，鹽酸酒精分化4—5秒，充分水洗返藍10rain，二甲苯透明，梯度酒精脫水，中性樹脂封片。2判斷標準：Fas／FasL蛋白

3、陽性染色標準主要為細胞膜或細胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒，根據(jù)腫瘤組織細胞的染色率和染色強度進行判斷，弱陽性()淺棕黃色，腫瘤組織陽性染色細胞數(shù)為5％一25％，陽性()棕黃色，腫瘤組織陽性染色細胞數(shù)為25％一50％，強陽性()，深棕黃色，腫瘤組織陽性染色細胞數(shù)為≥50％，陰性(一)偶有棕黃色細胞，但細胞數(shù)1000個。陽性判斷標準以()以上定為陽性。3統(tǒng)計分析：采用x2檢驗。線性相關(guān)分析。數(shù)據(jù)經(jīng)spssll5軟件包處理。實驗結(jié)果1Fas／FasL蛋