尼古丁對帕金森病鼠多巴胺神經元損傷的保護機制.pdf

1、帕金森病(PD)是多發(fā)于中老年人的神經退行性疾病,病理基礎是中腦黑質致密部的多巴胺(DA)能神經元變性凋亡,多巴胺合成減少。其因為迄今尚未完全明了,臨床上也沒有理想的防治措施。近年,慢性炎癥反應被認為是PD的主要繼發(fā)病理學因素,而小膠質細胞(MG)是腦內炎癥反應的主要參與者。MG通過激活后釋放大量的炎癥細胞因子和活性氧介導神經元的損傷,在PD中起重要促進作用。適當抑制小膠質細胞的活化能阻止DA神經元的進行性壞死。
　　 流行病學

2、調查顯示,吸煙與PD發(fā)病之間存在著明顯的負相關。也有證據顯示,煙草的主要成分尼古丁(NIC)可以改善PD的臨床表現,能夠減少DA神經元的丟失。體外實驗證實MG表面表達有α7型煙堿乙酰膽堿受體(nAChR-α7)并顯示NIC可以與該受體結合,抑制小膠質細胞的激活,減少炎性因子的釋放,發(fā)揮抗炎和保護多巴胺神經元的作用。然而NIC在體內是否通過nAChR-α7發(fā)揮神經保護作用卻鮮有報道。
　　 目的:
　　 本實驗通過觀察NI

3、C及nAChR-α7的阻斷劑-α-銀環(huán)蛇毒素(α-BTX)對脂多糖(LPS)誘導的PD大鼠模型的影響,探討NIC對DA神經元的保護機制。
　　 方法：
　　 60只Wistar大鼠隨機分為4組:對照組、模型組、尼古丁組和混合組。每天分別腹腔注射PBS、PBS、NIC、NIC與α-BTX的混合；第14d單側黑質一次性注射PBS、LPS、LPS和LPS;黑質注射藥物后2w進行阿樸嗎啡誘導的旋轉試驗,利用免疫組織化學觀測各組黑

4、質區(qū)酪氨酸羥化酶(TH)免疫陽性神經元及離子鈣結合蛋白1(Iba1)陽性細胞的形態(tài)和數量,用免疫組織化學平均光密度檢測各組黑質IL-6,TNF-α,iNOS的表達水平,并用免疫熒光雙標檢測模型組大鼠Iba1陽性細胞是否表達這些因子。
　　 結果：
　　 (1)對照組大鼠未誘導出旋轉運動；模型組73.3％大鼠誘導出明顯的旋轉運動(154.2±14.9圈/30min),與對照組有顯著差異(P<0.05):尼古丁組20％大鼠誘

5、導出旋轉運動(111.7±10.7圈/30min),與模型組相比顯著減弱(P<0.05)；混合組66.7％誘導出旋轉運動(145.1±12.7圈/30min),與模型組相比無顯著差異(P>0.05)。
　　 (2)對照組大鼠黑質區(qū)TH免疫陽性神經元數量為148.4±9.7個；模型組TH免疫陽性神經元數量(47.0±5.8個)與對照組相比顯著減少(P<0.05)；尼古丁組TH免疫陽性神經元數量(84.4±6.8個)與模型組相比顯著

6、增加(P<0.05)；混合組TH免疫陽性神經元數量(53.0±4.3個)與模型組相比無顯著差異(P>0.05)。
　　 (3)對照組大鼠黑質區(qū)Iba1免疫陽性細胞數量少(4.4±1.1),有少量的IL-6、TNF-α、iNOS陽性表達；模型組Iba1免疫陽性細胞數量(42.6±3.4)及IL-6、TNF-α、iNOS的表達量與對照組相比均顯著增多(P<0.05):尼古丁組Iba1免疫陽性細胞數量(14.4±3.2)及IL-6、T