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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探究S100A4在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)方式及其臨床意義;探索S100A4對(duì)子宮內(nèi)膜癌HEC-1B細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響及其可能的機(jī)制。
方法:采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)正常子宮內(nèi)膜、非典型增生及子宮內(nèi)膜癌組織中S100A4的表達(dá)。運(yùn)用脂質(zhì)體lipofectamine2000將構(gòu)建的4種S100A4-shRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)入HEC-1B細(xì)胞,取轉(zhuǎn)染效率最高組細(xì)胞進(jìn)行嘌呤霉素穩(wěn)定篩選及擴(kuò)增培養(yǎng),獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定
2、量 PCR及免疫印跡(western-blot)方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后S100A4、VEGF、MMP-2基因和蛋白的表達(dá)變化;運(yùn)用體外劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell小室法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞遷移、侵襲能力的改變。
結(jié)果:1.S100A4在內(nèi)膜癌組織腺上皮中的陽(yáng)性表達(dá)率(32%)顯著高于正常內(nèi)膜腺上皮(0%)(P<0.01),而其在子宮內(nèi)膜癌與非典型增生腺上皮中的表達(dá)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;S100A4蛋白的腺上皮表達(dá)與腫瘤的病理分級(jí)及淋巴
3、結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.001);2.S100A4-shRNA可有效抑制 HEC-1B細(xì)胞 S100A4的表達(dá),伴隨VEGF表達(dá)的下降(P<0.05),而MMP-2的表達(dá)無(wú)顯著差異;S100A4表達(dá)下調(diào)后,HEC-1B細(xì)胞體外遷移和侵襲能力也顯著下降(P<0.01)。
結(jié)論:S100A4在子宮內(nèi)膜癌腺上皮中的表達(dá)率隨內(nèi)膜癌組織的病理分級(jí)升高增加,在內(nèi)膜癌患者的預(yù)后中可能有重要意義。S100A4表達(dá)下調(diào)可明顯抑制腫瘤細(xì)胞的遷移、
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