重組人生長激素對內(nèi)毒素血癥大鼠的保護作用及機制的研究.pdf

1、革蘭陰性菌感染在臨床感染中占重要地位，其細胞壁外層的內(nèi)毒素是其主要毒性物質，內(nèi)毒素及其主要成分脂多糖(LPS)可引起內(nèi)毒素血癥導致多種臟器損傷，進一步可以形成全身炎癥綜合征(SIRS)、膿毒癥或多器官功能障礙綜合征(MODS)，這種狀況下使機體處于嚴重分解代謝狀態(tài)，導致蛋白凈生成率下降和負氮平衡并可因此而產(chǎn)生嚴重的后果。因此，給予治療干預以逆轉分解代謝反應是十分重要的。重組人生長激素(rhGH)已經(jīng)被用于在嚴重分解代謝病人中改善代謝狀態(tài)

2、的研究，病人的病情及預后均有明顯改善。但是也有資料顯示大劑量、長療程的生長激素可能與危重病人的死亡率和發(fā)病率的增加有關。一部分學者還認為大劑量的rhGH可能有促炎的作用，但是小劑量的rhGH在炎癥性疾病的急性期是否能夠使用?其具體的作用機制是什么?目前研究還很少。 本實驗通過腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素(脂多糖LPS)的方法制造內(nèi)毒素血癥大鼠模型。健康的SD大鼠隨機分正常對照組(A組)、內(nèi)毒素血癥組(B組)及rhGH治療組(C組)。A組不作

3、任何特殊處理，B組及C組均一次性經(jīng)腹腔內(nèi)注射LPS(5mg／kg)，C組隨即予以皮下注射rhGH(n5／kg)，B組則注射相同容積的生理鹽水(約lml)。應用生化檢查、免疫組化、RT-PCR等方法，動態(tài)觀察：1．血漿中谷草轉氨酶(AST)、谷丙轉氨酶(ALT)、NO濃度及iNOS活力。2．肝臟中細胞信號因子傳導抑制體．1、3(SOCS．1、SOCS．3)、誘生型一氧化氮合酶(iNOS)、腫瘤壞死因子(TNF-α)及白細胞介素6(IL-6

4、)mRNA的表達。3．T13NEI法測定肝細胞的凋亡情況。4．測肝臟、小腸及肺中NF-κB的表達。另用培養(yǎng)大鼠腹腔巨噬細胞分為6組，用LPS(100μg／L)刺激，然后再分別用o.8μg／L、4.0μg／L_、20.0μg／L、loo.oμg／L的rhGH處理，觀察不同濃度rhGH對LPS刺激的巨噬細胞NO產(chǎn)生及iNOSmRNA表達的影響。本研究旨在了解rhGH對內(nèi)毒素血癥大鼠急性應激期是否具有保護作用并探討其作用機制。 小劑量

5、rhGH治療結果表明： (1)rhGH能夠明顯保護肝臟功能，減輕內(nèi)毒素血癥時的肝細胞的凋亡； (2)rhGH能夠減輕重要臟器肝、小腸、肺的損傷；(3)rhGH能夠抑制內(nèi)毒素刺激狀態(tài)下巨噬細胞的活化。 小劑量rhGH對內(nèi)毒素血癥大鼠具有一定的保護作用，其機制可能是： (1)rhGH通過抑制肝臟iNOS mRNA的表達，減少了NO的產(chǎn)生，從而維護肝功，起到保護肝臟的作用。(2)rhGH在內(nèi)毒素血癥狀態(tài)下，誘導肝臟SOCS．1、

6、SOCS-3 mRNA的高表達，盡管可能導致機體對GH的不敏感，但在一定程度上也通過負反饋的機制抑制了炎癥介質的產(chǎn)生，維護了炎癥調控網(wǎng)絡的相對平衡。(3)rhGH能夠在內(nèi)毒素血癥狀態(tài)下，抑制肝細胞的凋亡，保護肝臟。 (4)rhGH通過減少腸、肝、肺組織的NF-κB的活化程度，在基因轉錄水平影響了TNF-α、IL-6、NO等多種促炎因子的轉錄。 (5)rhGH還能夠抑制內(nèi)毒素刺激后的巨噬細胞iNOSmRNA的表達，減少NO等炎癥介質的