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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:建立乙醛誘導(dǎo)的大鼠肝星狀細(xì)胞活化增殖模型,以不同濃度的枳棋子水提液干預(yù),通過(guò)相差顯微鏡觀察、MTT及Western Blot探討枳棋子水提液對(duì)乙醛誘導(dǎo)的肝星狀細(xì)胞增殖是否有抑制作用。
方法:選用大鼠肝星狀細(xì)胞株(HSC-T6)體外培養(yǎng),分為正常對(duì)照組、乙醛誘導(dǎo)組(200μmol/l)和在乙醛誘導(dǎo)組基礎(chǔ)上加入三種濃度枳棋子水提液的藥物干預(yù)組。在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化;MTT法測(cè)乙醛誘導(dǎo)24h后細(xì)胞活性,以及乙醛誘導(dǎo)后
2、不同濃度、不同時(shí)間枳棋子水提液干預(yù)后細(xì)胞活性變化;Western Blot測(cè)定α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的表達(dá)。
結(jié)果:
1.相差顯微鏡觀察,正常培養(yǎng)的對(duì)照組細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)良好,呈多邊梭形,胞質(zhì)豐富。乙醛誘導(dǎo)組生長(zhǎng)旺盛,胞體變大,伸出多處偽足。枳棋子水提液干預(yù)組生長(zhǎng)減慢,高濃度時(shí)細(xì)胞呈長(zhǎng)圓形,貼壁性差甚至脫落懸浮。
2.MTT法示乙醛誘導(dǎo)組細(xì)胞活性高于對(duì)照組。在乙醛造模基礎(chǔ)上加入不同濃度枳棋子水提液干預(yù)
3、后,細(xì)胞活性隨藥物濃度的增高而降低;以某一濃度枳棋子水提液干預(yù)誘導(dǎo)組細(xì)胞不同時(shí)間,細(xì)胞活性隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而降低。
3.WB法示乙醛誘導(dǎo)組α-SMA表達(dá)高于對(duì)照組;藥物干預(yù)組α-SMA表達(dá)隨藥物濃度升高而降低。
結(jié)論:
1.乙醛能夠促進(jìn)肝星狀細(xì)胞活化增殖,并可能與其它促肝纖維化因素產(chǎn)生協(xié)同作用加重肝纖維化程度。
2.枳棋子水提取液對(duì)活化的肝星狀細(xì)胞有抑制作用,且在一定范圍內(nèi)呈量效關(guān)系,對(duì)酒精性肝纖維
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