利用轉(zhuǎn)基因煙草生產(chǎn)乙肝疫苗的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)引起的一種世界性疾病,據(jù)統(tǒng)計(jì)全球HBV慢性攜帶者的總數(shù)超過2.8億.中國(guó)是乙型肝炎的高流行區(qū),有20％的人感染過.預(yù)防乙肝最有效的途徑是接種疫苗,然而目前使用的疫苗具有種種限制性因素,而利用轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)疫苗有望克服傳統(tǒng)疫苗所具有的種種缺點(diǎn).該試驗(yàn)利用從乙肝患者血清中提取的乙肝病毒基因組DNA為模板,依據(jù)Genbank登錄號(hào)為AY040804的序列設(shè)計(jì)含有Kozak序

2、列的引物,擴(kuò)增出乙肝表面抗原s蛋白基因(HBsAg),經(jīng)BLAST比對(duì),確認(rèn)其中有1個(gè)堿基發(fā)生突變,經(jīng)分析很可能為一種新的乙肝病毒毒株,現(xiàn)已提交GenBank進(jìn)行處理.利用克隆得到的HBsAg基因與二元植物載體pBI121成功地構(gòu)建出含有CaMV35s啟動(dòng)子、nos中止子、Kan植物篩選標(biāo)記及HBsAg基因的植物表達(dá)載體pBI121-HBsAg.并通過凍融法將此質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入土壤農(nóng)桿LBA4404,侵染煙草葉片,目前長(zhǎng)勢(shì)良好,正處在篩選當(dāng)中

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