Fas相關死亡結構域蛋白基因沉默對帕金森病模型鼠黑質凋亡相關蛋白的影響.pdf

1、F a s 相關死亡結構域蛋白基因沉默對帕金森病模型鼠黑質凋亡相關蛋白的影響摘要。目的：探討F a s 相關死亡結構域蛋白( F A D D ) 基因沉默對帕金森病( P D ) 大鼠行為學變化及黑質死亡受體( F a s ) 和半胱氨酸蛋白酶8 ( C a s p a s e 一8 ) 表達的影響。方法：應用化學修飾的干擾R N A 及立體定向技術等，在制作P D 模型前黑質內注入F A D Ds i R N A 、F A D Ds

2、i R N A 陽性對照物或F A D Ds i R N A 陰性對照物。觀察正常對照組、P D 組、F A D D s i R N A 組、F A D Ds i R N A 陽性對照組和F A D Ds i R N A 陰性對照組( 每組各1 5 只) 大鼠阿樸嗎啡誘導的旋轉行為的改變；采用W e s t e r n 印跡分析和R T —P C R 等方法，檢測以上5 組大鼠黑質F A D D 、F a s 和C a s p a s

3、e 一8 蛋白及m R N A 的半定量表達。結果：正常對照組大鼠阿樸嗎啡誘導下無旋轉行為，其余4 組旋轉次數超過6 r ／m i n( 持續(xù)3 0 m i n ) 的大鼠分別為1 2 ( 1 2 ／1 4 ) 、3 ( 3 ／1 3 ) 、4 ( 4 ／1 5 ) 、1 1 ( 1 1 ／1 4 ) ，組間比較差異具有統(tǒng)計學意義( Z 2 = 1 8 ．5 6 ，P = O ．0 0 0 ) ；與正常組比較，P D 組各個蛋白及m R

4、 N A 的表達均明顯升高；與P D 組比較，F A D D s i R N A 組F A D D 和C a s p a s e 一8 蛋白及m R N A 的表達受到明顯抑制，差異具有統(tǒng)計學意義，但P D 組和陰性對照組間及其余3 組間比較差異均無統(tǒng)計學意義。與正常組比較，其余4 組F ．a s 蛋白及m R N A 的表達均明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義，但4 組間比較差異無統(tǒng)計學意義。結論：死亡受體凋亡通路在P D 發(fā)病機制中起重要

5、作用，而F A D Ds i R N A 能夠有效抑制此通路，從而在一定程度上具有神經保護作用。碩士研究生栗永生( 神經病學)指導教師 謝安木教授關鍵詞：F a s 相關死亡結構域蛋白質；基因沉默；帕金森?。杭毎蛲瞿夸浺Ｑ?????????????????????????????????????????????1第l 章材料和方法???????????????????????????··31 ．1 實驗對象和主要

6、材料?????????????????????????31 ．2 實驗方法??????????????????????????????51 ．3 實驗步驟??????????????????????????????61 ．4 統(tǒng)計學處理????????????????·?????????????8第2 章結果?????????????????????????????????92 ．1 大鼠行為學改變??????????????

7、?????????????92 ．2 W e s t e r n 印跡法檢測?????????????????????????·92 ．3 R T —P C R 產物的半定量分析??????????????????????·1 02 ．4 附圖???????????????????????????????··1 1第3 章討論????????????????????????????????

8、3;l 3第4 章結論????????????????????????????????1 5參考文獻?????????????????????????????????··l 6綜述??????????????????????????????????????????????··19綜述參考文獻????????????????????????????????2 6攻讀學位期間的研究成果????????