殼聚糖導管聯(lián)合嗅鞘細胞移植修復大鼠脊髓損傷的研究.pdf

1、第一部分 嗅鞘細胞的原代培養(yǎng)及純化和形態(tài)學觀察
　　 實驗一：新生大鼠嗅鞘細胞的原代培養(yǎng)及形態(tài)學觀察
　　 目的：探討新生大鼠嗅鞘細胞的原代培養(yǎng)及純化方法并對其形態(tài)學特征進行觀察。
　　 方法：分離培養(yǎng)新生大鼠嗅球中的嗅鞘細胞，聯(lián)合應用差速貼壁法和阿糖胞苷抑制法進行純化，NGFRp75免疫組化染色鑒定細胞。
　　 結(jié)果：可獲得較高純度的嗅鞘細胞，其形態(tài)主要為雙極，多極和無突起的“油煎蛋”形，細胞突起細長并

2、交織成網(wǎng)狀。
　　 結(jié)論：該方法步驟簡便，可重復性好，具有較高的實用價值。
　　 實驗二：成年大鼠與新生鼠嗅鞘細胞形態(tài)學和生長特性差異的研究
　　 目的：對成年大鼠和新生鼠嗅鞘細胞的形態(tài)學和生長特征的差異進行觀察。
　　 方法：使用相同培養(yǎng)純化方法分別培養(yǎng)成年大鼠和新生鼠嗅球表層中的嗅鞘細胞，NGFRp75免疫組化染色鑒定細胞并觀察不同時期兩者嗅鞘細胞的形態(tài)差異和生長速度。
　　 結(jié)果：均可獲得較

3、高純度的嗅鞘細胞，但兩類細胞在生長特征和形態(tài)學上略有差異。
　　 結(jié)論：成年大鼠和新生鼠嗅鞘細胞形態(tài)學和生長特征有差異。
　　 第二部分：殼聚糖的生物相容性研究
　　 實驗一：殼聚糖與大鼠嗅鞘細胞生物相容性的研究
　　 目的：研究殼聚糖與大鼠嗅鞘細胞的生物相容性。
　　 方法：將大鼠嗅鞘細胞接種至殼聚糖包被的培養(yǎng)板上共同培養(yǎng)，觀察嗅鞘細胞在膜上的形態(tài)及生長增殖情況，并與對照組相比較。
　　

4、 結(jié)果：嗅鞘細胞可在殼聚糖膜上貼壁生長，細胞形態(tài)及數(shù)量與空白對照組相比無顯著差異，但與賴氨酸包被組相比細胞數(shù)量偏低。
　　 結(jié)論：嗅鞘細胞與殼聚糖有良好的生物相容性。
　　 實驗二：殼聚糖膜在大鼠脊髓組織的降解與生物相容性研究
　　 目的：研究殼聚糖膜在大鼠脊髓組織的降解與生物相容性。
　　 方法：將36只SD大鼠隨即分為實驗組和對照組，將殼聚糖膜和醫(yī)用絲線分別植入脊髓組織，于術后7，14，28天測定殼聚

5、糖膜的重量并評估局部組織炎性反應。
　　 結(jié)果：殼聚糖膜的降解率分別為14.8[％]，18.9[％]，25.0[％]，殼聚糖膜和醫(yī)用絲線在植入局部引發(fā)的炎癥反應類似。
　　 結(jié)論：殼聚糖膜易于降解并與脊髓組織有良好的生物相容性，是一種可應用于脊髓損傷修復的新型生物材料。
　　 第三部分：殼聚糖導管聯(lián)合嗅鞘細胞移植修復大鼠脊髓損傷的研究
　　 目的：研究殼聚糖導管聯(lián)合嗅鞘細胞(OEC)移植對SD大鼠脊髓損傷

6、的修復作用。
　　 方法：原代培養(yǎng)新生SD大鼠嗅鞘細胞并建立脊髓損傷動物模型，將殼聚糖導管和OECs植入脊髓損傷處(實驗組)，設立單純嗅鞘細胞移植組和單純殼聚糖導管植入組為實驗對照A,B組，脊髓損傷+DMEM-F12培養(yǎng)基注射組為空白對照組。術后評估大鼠后肢運動功能恢復情況，分別于2，4，6，8周取材進行組織學觀察。
　　 結(jié)果：嗅鞘細胞可在脊髓損傷局部存活并促進軸突再生，殼聚糖導管可橋接脊髓兩斷端，對軸突再生提供支架作