分化相關基因NDRG1在食管鱗癌的表達及誘導分化治療研究.pdf

1、鄭州大學博士學位論文分化相關基因NDRG1在食管鱗癌的表達及誘導分化治療研究姓名：賀付成申請學位級別：博士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：張云漢李惠翔20060528鄭州大學2006年博士研究生論文分化相關基因NDRGl在食管鱗癌的表達及誘導分化治療研究劑，如Nicl。、Ni。s。、同型半胱氨酸、2B一巰基乙醇、農霉素、溶血磷脂膽堿、銀毛酸、維甲酸類、維生素D、佛波酯等可均可調節(jié)NDRGlmRNA或蛋白質的表達。由于NDRGl可被多種

2、分化調節(jié)劑誘導表達，使NDRGlmRNA或蛋白質的表達上調，因此，采用分化誘導劑誘導食管癌細胞，檢測NDRGl的表達及細胞增殖情況，有利于對食管癌誘導分化機制的探討。文獻檢索表明，有關NDRGl在食管鱗癌組織表達情況的研究，國外僅有l(wèi)篇文獻報道，國內尚未見相關文獻報道，而用分化誘導荊全反式維甲酸(all—transretinoicacid，ATR^)、佛波酯(12一tetradecanoy卜phorbo卜13一acetate，TPA)、

3、l，25(oH)2VD3、丁酸鈉(sodiumbutyrate)等作用于人食管癌Ec9706細胞，檢測NDRGl基因表達的變化，國內外均未見文獻報道。為系統地探討NDRGl在食管癌的表達情況，研究其與食管癌發(fā)生、發(fā)展的關系，了解分化誘導劑ATRA、TPA等對人食管癌Ec9706細胞NDRGl表達的影響及NDRGl基兇表達在細胞增殖中的作用，本文采用免疫組化sP法、原位雜交和RT—PcR等技術，檢測了49例高發(fā)區(qū)食管鱗癌組織、23例癌旁不

4、典型增生組織及49例正常粘膜中NDRGl的表達情況；采用免疫組化sP法、原位雜交、RT—PcR、細胞增殖抑制實驗岍T法和流式細胞技術等檢測了分化誘導劑ATRA、TPA等作用于人食管癌Ec9706細胞后，NDRGl基因表達、細胞增殖及細胞周期的變化；采用RNA干擾技術，構建pSuperneoGFPNDRGlsiRNA，并用脂質體將其轉染入Ec9706細胞，觀察轉染后Ec9706細胞NDRGl基因表達及其與腫瘤生長、細胞增殖和細胞周期變化的

5、關系。在體外實驗的基礎上，本研究成功地構建了裸鼠食管癌移植瘤動物模型，并采用維甲酸、佛波酯等分化誘導劑對移植瘤進行治療，分別觀察了移植瘤生長情況；抑制NDRGl基因表達后的轉染細胞移植瘤生長情況：并采用免疫組化技術檢測誘導分化荊治療后及RNAi后裸鼠移植瘤中NDRGl蛋白表達情況。通過以上實驗，試圖闡明NDRGl在食管癌的表達規(guī)律；探討NDRGl基因在腫瘤細胞誘導分化過程中的作用：研究Ec9706細胞NDRGl基因表達與腫瘤生長、細胞增