脂肪酸結合蛋白4對子宮內膜上皮細胞的影響.pdf

1、背景：
　　胚胎著床是指胚泡進入子宮腔后與子宮內膜粘附，并逐漸埋入子宮內膜的過程，它是生殖的關鍵性調控環(huán)節(jié)，著床失敗是早期妊娠丟失的主要原因。胚胎著床受到激素，細胞因子、生長因子、粘附因子及其配基等組成的分子網絡的精細調控，但其機制遠未闡明。我們前期實驗發(fā)現人子宮內膜細胞表達脂肪酸結合蛋白4（FABP4，常被稱為aP2），利用臨床標本，進一步發(fā)現分泌期子宮內膜組織表達FABP4較增生期上調，蛻膜組織的FABP4表達較非妊娠期子宮內

2、膜進一步增加;雌、孕激素分別及聯合刺激作用子宮內膜細胞，結果顯示雌、孕激素分別作用和雌孕激素聯合作用，對FABP4的表達均有上調作用。
　　目的：
　　明確FABP4是否參與調控子宮內膜細胞的生物學功能，觀察FABP4對子官內膜容受性標志性因子調控作用，應用體外粘附模型驗證FABP4是否參與對胚胎粘附和著床的調控;研究和探索FABP4是否參與胚胎著床的過程及其可能的機制。
　　方法：
　　1、Western bl

3、ot和細胞免疫熒光檢測子宮內膜細胞lshikawa和RL-952細胞FABP4的表達;2、采用siRNA干擾FABP4基因的表達和FABP4特異性抑制劑阻斷FABP4功能，利用CCK-8法檢測細胞增殖能力，劃痕試驗檢測細胞遷移、Transwell檢測細胞侵襲力;3、采用FABP4特異性抑制劑阻斷Ishikawa和RL-952細胞FABP4功能，利用實時定量PCR檢測子宮內膜容受因子白血病抑制因子(leukemia inhibitory

4、factor, LIF)、整合蛋白beta3(Integrin beta3，Integrin-β3)、緊密連接蛋白4(claudin4)的蛋白水平。
　　結果：
　　(1) Western blot和細胞免疫熒光顯示Ishikawa和RL-952細胞表達FABP4;
　　(2).靶向性siRNA干擾Ishikawa和RL-952細胞FABP4的表達和特異性FABP4抑制劑阻斷FABP4功能顯著抑制子宮內膜細胞增殖、遷移