格木中具細胞毒活性的化學成分研究;格木中微量咖薩因型酰胺和短萼儀花中化學成分的在線分析方法研究.pdf

1、格木(Erthrophleum fordii Oliver)為豆科(Leguminosae)格木屬植物，又名赤葉木、斗登鳳，是我國傳統(tǒng)草藥。生于山地密林或疏林中，分布于廣西、廣東、福建、臺灣、浙江等省區(qū)。其樹皮和種子可入藥，性味辛、平，有毒，入心經(jīng)。主要功效為益氣活血，可治療心氣不足所致的氣虛血瘀之癥，即心悸、氣短、乏力、下肢及全身浮腫等。該植物種子和莖皮有毒，中毒后產(chǎn)生強烈而持久的局部麻醉。非洲同屬植物E.guinense的莖皮曾用作

2、箭毒，人中毒后因呼吸抑制而死亡。藥理實驗表明：格木樹皮的乙醇提取物，及其乙酸乙酯和正丁醇萃取物具有一定的細胞毒活性。本課題組曾對其活性部位的化學成分進行過研究，從中分離得到了黃酮、二萜苷和三萜等化合物，但是藥理實驗表明這些化合物都不具有細胞毒活性。為了尋找其活性成分，本論文作者繼續(xù)對其活性部位-乙酸乙酯和正丁醇萃取物進行化學成分研究，從中分離得到了17個化合物，包括8個咖薩因型二萜酰胺類生物堿，1個黃烷醇，4個黃烷醇縮合鞣質(zhì)，2個三萜，

3、1個甾醇及其1個單糖苷類化合物。 從格木樹皮的乙醇提取物中分離得到的化合物，采用波譜和化學方法確定其結構為：3β-O-巴豆?；?降erythrophlamide(1)，3β-O-乙?；?降erythrophlamide(2)，6α-羥基-降cassamide(3)，7-去氫-降erythrosuamide(4)，降erythrosuamide22-O-β-D-半乳糖苷(5)，6α-羥基-降cassamide 22-O-β-D-半

4、乳糖苷(6)，降cassamide(7)，降erythrosuamide(8)，刺槐亭醇(9)，刺槐亭醇-(4→6)-刺槐亭醇(10)，縮合鞣質(zhì)B5(11)，非瑟酮醇．(4β→6)-刺槐亭醇(12)，雙非瑟酮醇-兒茶素(13)，白樺酸(14)，乙酰莫繞酸(15)，β-谷甾醇(16)，胡蘿卜苷(17)；其中6個化合物(1-6)為新化合物，化合物7，8，10-13為首次從本種植物中分離得到的已知化合物。 本文利用MTT法對所得到的咖

5、薩因型二萜酰胺類單體化合物進行了幾種人腫瘤細胞株的細胞毒活性測定。同時，采用WestemBlot方法考察了化合物3和7細胞毒活性的作用機理。根據(jù)已有單體化合物的UV、ESI-MS、ESI-MS<'n>、NMR等譜學數(shù)據(jù)，總結出具有類似結構的化合物的譜學規(guī)律。通過對提取物組分中微量成分進行在線檢測，將在線實驗得到的數(shù)據(jù)與總結出的規(guī)律進行比較分析，期望推測出組分中微量成分的結構?；谏鲜龅难芯克悸罚瑢母衲緲淦ぶ蟹蛛x得到的8個咖薩因類二萜酰

6、胺類化學成分的ESI-MS'’的裂解行為進行了研究，對其特征性裂解行為進行了深入地分析，探討特征性裂解碎片離子及其強度與結構的關系，結合其特征性的UV最大吸收波長和<'1>HNMR數(shù)據(jù)，總結出一些具有規(guī)律性的結論。在此基礎上，對含有微量咖薩因型二萜酰胺類成分的總生物堿中的4個組分進行HPLC-HR-MS、HPLC-DAD-ESI-MS<'n>、HPLC-NMR測定。根據(jù)以上得出的規(guī)律性結論和在線測定的譜學數(shù)據(jù)，推測出其中9個微量的具有類

7、似結構的化合物的結構。通過研究，建立了在線鑒定植物提取物組分中微量咖薩因型二萜酰胺類成分結構的分析方法。 本文對含有多種酚類成分的儀花屬(Lysidicie)植物提取物進行了在線結構分析的研究。豆科儀花屬包括兩種植物，即儀花(L. rhodostegia Hance)和短萼儀花(L.brevicalyx Wei)。本課題組曾對儀花(L.rhodostegia)的根一單刀根的化學成分進行了系統(tǒng)的研究，從中分離得到了間苯三酚、二苯乙

8、烯、黃酮類等酚類化合物。鑒于同屬植物化學成分的相似性，推測其同屬植物短萼儀花中也可能含有類似結構的化合物。為了快速鑒定短萼儀花中化學成分的結構，基于同樣的研究思路，首先考察了從單刀根中分離得到的6個間苯三酚、5個二苯乙烯、9個黃酮類化合物的ESI-MS<'n>的裂解行為，對其特征性裂解行為進行了深入研究，總結出特征性裂解碎片離子與結構的關系。結合UV特征，闡明了化合物類型、取代基等結構因素與其UV最大吸收波長和質(zhì)譜裂解行為等譜學特征的關

9、系，從中得出一些規(guī)律性的結論。在此基礎上，對短萼儀花提取物中酚類成分的2個組分進行了HPLC-HR-MS、HPLC-DAD-ESI-MS<'n>、HPLC-NMR測定，通過與以上結論進行比較分析，推測出其中7個不同類型成分的結構，分別為白藜蘆醇-3-O-(6-O-對羥基桂皮?；?-B-D-葡萄糖苷(L1)，硫黃菊噢瞬(L2)，柚皮素(L3)，白藜蘆醇-3-O-[6-O-(3-甲氧基-4-羥基)．桂皮?；?β-D-葡萄糖苷(L4)，儀花苷